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基于微流控液滴的单细胞培养及筛选平台的中期报告 该项目旨在开发一种基于微流控液滴的单细胞培养及筛选平台,以便于对单个细胞进行分析和筛选。项目进展如下: 1.设计微流控液滴制备芯片 设计并制造了微流控液滴制备芯片,采用PDMS材料制备通道结构,并与玻璃片封装。芯片主要包括两个部分:一是产生微流控液滴的区域,二是固定微流控液滴的区域。在生产微流控液滴时,采用了定频高压阀法,能够产生较为稳定的微流控液滴。 2.制备单细胞悬浮液 从绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠分离单个细胞,通过限制稀释的方法获得单细胞悬浮液。 3.单细胞的捕捉和分配 将单细胞悬浮液和葡萄糖液分别加入芯片预处理好的油相和稳定剂中,通过微流控液滴制备芯片产生的微流控液滴进行单细胞的分配和捕捉。 4.单细胞培养 将分配捕获到的单细胞微流控液滴经过一定的培养条件,进行单细胞培养。培养条件主要包括细胞生长缓冲液、CO2气体平衡和温控等条件。 5.单细胞测序 使用单细胞测序技术对生长出的单个细胞进行基因测序,得到单个细胞的RNA信息。 目前,我们已经成功将单个细胞分配在微流控液滴中进行培养,并且获得了单个细胞的RNA信息。接下来,我们将进一步完善该平台的筛选功能,以便于对单细胞进行快速、高效的筛选。