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水稻CCCH型锌指核酸结合蛋白基因C3H12的分离克隆和功能鉴定的中期报告 摘要 CCCH型锌指核酸结合蛋白在植物的生长发育和逆境胁迫响应中起着重要的调控作用。本研究利用基因克隆技术和生物信息学分析,成功分离克隆了水稻CCCH型锌指核酸结合蛋白基因C3H12,并初步探讨了其功能。 实验结果表明,C3H12基因开放阅读框长为1008bp,编码335个氨基酸,含有一个CCCH型锌指结构域,并且在水稻各个组织中都有表达。通过亚细胞定位实验发现C3H12蛋白定位于细胞核中。利用荧光素酶报告系统观察C3H12基因的启动子活性,结果表明其具有组织特异性,对盐、干旱胁迫和ABA处理都具有诱导作用。进一步利用转录组学、蛋白质组学和生化分析等多种手段研究C3H12基因在稻米籽粒发育过程中的表达和调控机制,结果发现C3H12基因可能参与了稻米品质的形成以及干旱逆境响应等生物学过程中的调控作用。 综合以上结果,我们认为C3H12基因在水稻的生长发育和逆境胁迫响应中发挥了一定的调控作用,但其具体的调控机制和生物学功能还需进一步的研究。 关键词:CCCH型锌指核酸结合蛋白,C3H12,水稻,生长发育,逆境胁迫 Abstract CCCH-typezincfingernucleicacid-bindingproteinsplayimportantregulatoryrolesinplantgrowth,developmentandstressresponse.Inthisstudy,usinggenecloningtechniquesandbioinformaticsanalysis,thericeCCCH-typezincfingernucleicacid-bindingproteingeneC3H12wassuccessfullyclonedanditsfunctionwaspreliminarilyexplored. TheexperimentalresultsshowedthattheopenreadingframeoftheC3H12genewas1008bplong,encoding335aminoacids,containingaCCCH-typezincfingerdomain,andexpressedinvarioustissuesofrice.SubcellularlocalizationexperimentsshowedthattheC3H12proteinwaslocatedinthenucleus.ThepromoteractivityoftheC3H12genewasobservedbyusingtheluciferasereportersystem,andtheresultsshowedthatithadtissuespecificityandinducibleeffectonsalt,droughtstressandABAtreatment.FurtherstudiesontheexpressionandregulationmechanismofC3H12geneinricegraindevelopmentprocessbytranscriptome,proteomicsandbiochemicalanalysisshowedthatC3H12genemightbeinvolvedintheregulationofricequalityformationanddroughtstressresponse. Inconclusion,webelievethattheC3H12geneplaysacertainregulatoryroleinthegrowth,developmentandstressresponseofrice,butitsspecificregulatorymechanismandbiologicalfunctionstillneedfurtherstudy. Keywords:CCCH-typezincfingernucleicacid-bindingprotein,C3H12,rice,growthanddevelopment,stressresponse