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禾谷镰孢菌β-微管蛋白基因内含子功能以及与多菌灵敏感性关系研究的中期报告
本研究旨在探究禾谷镰孢菌的β-微管蛋白基因（tubB）内含子的功能以及该基因与多菌灵敏感性之间的关系。本报告为中期报告，介绍研究的进展情况。
一、研究背景
禾谷镰孢菌是一种重要的植物病原菌，在农业生产中具有较高的危害性。多菌灵是一种广谱杀菌剂，可有效地防治禾谷镰孢菌等植物病原菌。但是，近年来多菌灵的使用过度导致了许多问题，如多菌灵的耐药性问题。因此，探究禾谷镰孢菌的抗药机制及其与多菌灵敏感性之间的关系具有重要意义。
二、研究方法
本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了禾谷镰孢菌tubB基因敲除菌株，以探究该基因的功能。同时，利用荧光药剂Rhodamine123染色及荧光显微镜观察菌株的微管骨架结构。此外，还通过药敏实验探究禾谷镰孢菌对多菌灵的敏感性。
三、研究进展
1.构建了禾谷镰孢菌tubB基因敲除菌株
本研究利用CRISPR/Cas9技术，针对禾谷镰孢菌tubB基因设计了两个引物序列。经PCR扩增和测序验证，成功构建了tubB基因敲除菌株。
2.观察菌株的微管骨架结构
利用Rhodamine123染色和荧光显微镜观察了野生型和tubB基因敲除菌株的微管骨架结构。观察结果显示，野生型菌株的微管骨架结构完整，而tubB基因敲除菌株的微管骨架结构受到明显影响，且菌株形态畸形。
3.探究禾谷镰孢菌对多菌灵的敏感性
利用药敏实验比较了野生型和tubB基因敲除菌株对多菌灵的敏感性。结果显示，与野生型菌株相比，tubB基因敲除菌株的多菌灵敏感性明显降低。
四、未来计划
下一步，将进一步探究禾谷镰孢菌tubB基因内含子的功能，并深入研究tubB基因与禾谷镰孢菌多菌灵敏感性之间的关系，旨在为探索禾谷镰孢菌的抗药机制提供理论基础。