细胞工程知识点陈永勤.docx

植物组织培养简介

1.细胞工程（CellEngineering）：在体外对生物的细胞进行生长与分化的调控、遗传重组与改良，使其生产出人类所需要的产品。
2.细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的理论基础；验证细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的动力。
3.细胞分裂素与生长素的浓度比值决定着愈伤组织根或芽的形成。细胞分裂素/生长素的比值：高：形成芽；低：形成根；相当：愈伤组织增殖，但不分化。
4.植物组织培养在植物性状改良上的应用:
=1\*GB3\*MERGEFORMAT①.胚培养可克服远源杂交不孕的困难；
=2\*GB3\*MERGEFORMAT②.花药（花粉）培养可大大缩短育种年限；
=3\*GB3\*MERGEFORMAT③.原生质体融合技术可克服有性杂交不亲和，创造远源杂种、甚至新的物种；
=4\*GB3\*MERGEFORMAT④.单细胞培养技术可用于突变体的筛选。

植物组织培养的设施

1.培养室所需要的设备：
=1\*GB3\*MERGEFORMAT①.培养架:培养架的设计既要考虑充分利用培养室的空间，也要考虑取放材料方便。
=2\*GB3\*MERGEFORMAT②.加温/降温设备：空调
=3\*GB3\*MERGEFORMAT③.光照和控光设备。分为光培养室和暗培养室。光培养室常用日光灯照明，并安置控制光照时间的自动开关。
2.瓶盖、瓶塞、或者封口膜的透气性能对材料的培养有显著影响，透气性能不好的，容器中湿度高（饱和），容易导致植物材料出现玻璃化（生理病态，植物材料呈水渍状，深绿色，刚脆，无继续培养的价值）

植物组织培养基

1.培养基的重要性:
1)植物材料生长的营养来源；
2)调节植物材料生长与分化的主要途径。
2.培养基的组成：
=1\*GB3\*MERGEFORMAT①.水：要求纯净。应用蒸馏水、去离子水，而不用自来水。
=2\*GB3\*MERGEFORMAT②.无机营养成分：
植物生长发育需要有16种必需元素：大量元素：C,H,O,N,P,K,Ca,Mg,S；微量元素：Fe,Cl,Cu,Mo,B,Zn,Mn。不同培养基的无机盐（特别是大量元素）的浓度差异很大。
=3\*GB3\*MERGEFORMAT③.有机营养：
有机营养（有机成分）：维生素和氨基酸的总称。
常用：肌醇、烟酸、维生素B6、维生素B1和甘氨酸等。
其它维生素：维生素M（叶酸）、维生素B2（核黄素）、泛酸钙等。
其它氨基酸：谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺等
=4\*GB3\*MERGEFORMAT④.碳源：最常用的糖是蔗糖(sucrose)，但也有时用葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)或其它的糖(lactose,maltose)，有时几种糖混用。糖是营养物质，但不是越多越好。培养基中糖的用量大多在10—60g/L，一般为20—30g/L。
=5\*GB3\*MERGEFORMAT⑤.植物生长物质：植物生长物质是植物激素和植物生长调节剂的总称。
植物激素：植物合成的、微量就有显著生理效应的物质。
植物生长调节剂：人工合成的、具有植物激素相似作用的物质。
=6\*GB3\*MERGEFORMAT⑥.凝固剂：在植物组织培养中，琼脂（agar）是最常用的凝固剂，用量为6-12g/L。另外还有phytagel,Gelrite,4g/L。
=7\*GB3\*MERGEFORMAT⑦.有机附加物：水解酪蛋白、水解乳蛋白、蛋白胨、胰蛋白胨、酵母提取物：用量为0.1-10g/L，一般为0.5-3g/L。椰子汁：100-200ml/L。
=8\*GB3\*MERGEFORMAT⑧.其它物质：防止与减缓植物材料褐化的物质：
1）抗氧化剂：抗坏血酸（Vc）、L-半光氨酸、柠檬酸、二硫苏糖醇等。
2）吸附剂：活性炭、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）。
活性炭吸附无选择性；改善培养效果、促进生根。PVP专一吸附酚类物质。
3.植物激素在植物组织培养中的作用：
=1\*GB3\*MERGEFORMAT①生长素：(1)促进细胞分裂、增殖，导致愈伤组织的形成(2,4-D>NAA>IAA,IBA)；(2)控制器官的分化，诱导根的形成。（IBA>NAA>IAA)
=2\*GB3\*MERGEFORMAT②细胞分裂素:促进细胞分裂、增殖，导致愈伤组织的形成；控制器官的分化，诱导芽的形成和增殖。
=3\*GB3\*MERGEFORMAT③赤霉素:赤霉素最显著的作用是促进细胞的伸长，也有打破种子休眠的作用。在植物组织培养中使用赤霉素主要是促进芽或茎的伸长。赤霉素对热不稳定，故不宜用高温法消毒。
=4\*GB3\*MERGEFORMAT④乙烯