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PES1的SUMO化修饰及其相关功能的研究的任务书.docx

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PES1的SUMO化修饰及其相关功能的研究的任务书 任务书 一、任务概述 随着生命科学的发展和深入，对蛋白质修饰的研究日益受到关注。SUMO(SmallUbiquitin-likeModifier)是一种与泛素相似的蛋白质修饰语言，可以调节其靶蛋白的结构和功能。PES1是一种与RAS相关的核蛋白，能够参与DNA复制过程、基因表达调控等生物学过程。本研究的主要任务是探究PES1的SUMO化修饰及其相关功能。 二、研究目的 1.系统地分析PES1SUMO化修饰的位置、程度、稳定性等影响因素； 2.探究PES1SUMO化修饰对其功能的影响及其下游调控机制； 3.阐明PES1SUMO化修饰在细胞周期、DNA损伤修复等生物学过程中的作用机制； 4.探究PES1SUMO化修饰在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等方面的作用机制。 三、研究内容 1.分离纯化PES1蛋白：从细胞中分离纯化PES1蛋白，用于后续的鉴定和分析； 2.鉴定PES1SUMO化修饰位置：通过Westernblot、MS等实验手段确定PES1蛋白的SUMO化修饰位置； 3.探究PES1SUMO化修饰的稳定性和程度：通过InvivoSUMOylationassay、Chaseassay等实验手段研究PES1SUMO化修饰的稳定性和程度； 4.探究PES1SUMO化修饰对其功能的影响及其下游调控机制：通过RNAi、ChIP等实验手段分析PES1SUMO化修饰对其功能的影响及其下游调控机制； 5.阐明PES1SUMO化修饰在细胞周期、DNA损伤修复等生物学过程中的作用机制：通过细胞培养、流式细胞术等实验手段阐明PES1SUMO化修饰在细胞周期、DNA损伤修复等生物学过程中的作用机制； 6.探究PES1SUMO化修饰在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等方面的作用机制：通过体内外实验手段探究PES1SUMO化修饰在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等方面的作用机制。 四、研究意义 本研究对于探究PES1SUMO化修饰及其相关机制具有重要意义，可以帮助我们加深对蛋白质SUMOylation修饰机制的认识，理解PES1的生物学功能，并为后续的肿瘤治疗提供新思路和新方法。 五、研究进度 第一年：分离纯化PES1蛋白、确定PES1SUMO化修饰位置、探究PES1SUMO化修饰的稳定性和程度。 第二年：探究PES1SUMO化修饰对其功能的影响及其下游调控机制、阐明PES1SUMO化修饰在细胞周期、DNA损伤修复等生物学过程中的作用机制。 第三年：探究PES1SUMO化修饰在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等方面的作用机制并撰写论文。 六、参考文献 1.SaitohH,HincheyJ.Functionalheterogeneityofsmallubiquitin-relatedproteinmodifiersSUMO-1versusSUMO-2/3.JBiolChem2000;275:6252-6258. 2.MatsuuraK,HuangN,CoccaroRCetal.Dynamicsoflysine48-linkedubiquitinchainsassembledinvitrobytheanaphase-promotingcomplex/cyclosome(APC/C)ubiquitinligase.JBiolChem2010;285:34601-34608. 3.WangJ,LiuY,LiZetal.TheSUMOE3ligase-likeproteinsPIAL1andPIAL2interactwithMOM1andformanovelcomplexrequiredfortranscriptionalsilencing.PlantCell2013;25:2072-2084.