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乳腺癌干细胞生物学特性及调控机制研究的任务书 一、研究任务 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,其发生与发展具有复杂性、异质性,也存在乳腺癌干细胞(cancerstemcells,CSCs)的存在。CSCs具有自我更新、自我维持、缺乏分化和程序性细胞死亡等特征,它们可以促进肿瘤生长、再生和转移。因此,乳腺癌CSCs研究成为当前肿瘤研究中的重要内容之一。 本研究计划围绕乳腺癌CSCs,探讨其生物学特性及调控机制。具体研究内容包括以下几个方面: 1.CSCs鉴定及分离 根据CSCs的特征,结合特定蛋白体表达和功能鉴定,建立乳腺癌CSCs的分离和鉴定系统。 2.CSCs的基因表达谱分析及组学研究 通过基因芯片技术分析乳腺癌CSCs的转录组,构建乳腺癌CSCs的基因表达谱图谱,并对其进行生物信息学分析,以探究CSCs的分化途径、调控机制和多样性。 3.CSCs行为特征和基本调控机制的研究 建立在体和体外模型,探讨CSCs的增殖、凋亡、分化和转移行为,以及与基本调控机制的关联。 4.CSCs与肿瘤微环境的相互作用 探讨CSCs与肿瘤微环境的相互作用,包括细胞外基质、免疫细胞、血管和神经元等方面。 以上几个方面的研究将使我们对于乳腺癌CSCs的生物学特性、作用机制和临床转化有更清晰的认识。 二、研究方法 本研究计划采用多种方法进行探讨CScs的生物学特性和分子调控机制,包括以下几个方面的方法: 1.细胞筛选:根据CSCs的标志物如CD44+CD24-,进行单克隆细胞的排序和功能鉴定。 2.细胞系构建:从乳腺癌患者的肿瘤组织中获取CSCs,通过培养及传代来建立CSCs细胞系。同时也可采用体外和体内方法构建类CSCs的细胞模型,如球状体培养法、裸鼠移植法等。 3.转录组分析:采用基因芯片技术(microarray)分析乳腺癌CSCs与非CSCs细胞系之间的转录差异。运用生物信息学方法挖掘差异表达基因主要功能,包括通路靶点、关系网络及分子功能等。 4.蛋白质体学分析:采用蛋白组学技术,从CSCs中鉴定相关蛋白质,通过验证及功能鉴定,确定CSCs在蛋白质水平上的差异,为生物学特性的研究提供重要参考。 5.分子生物学技术应用:包括基因敲除、基因编辑、核酸拓扑结构、表观遗传学修饰等技术,应用于CSCs生物学行为及分子机制的探究。 三、研究意义 研究乳腺癌CSCs的生物学特性及调控机制,对于深入认识乳腺癌的发生、发展和转移具有重要意义。主要体现在以下几个方面: 1.CSCs作为乳腺癌发生、发展和转移的重要推动力,其生物学特性及调控机制的研究将有助于深入探究乳腺癌的病因学和病理生理学。 2.通过研究CSCs与肿瘤微环境的相互作用,可以更好地了解肿瘤发生与发展的全过程及其机制。 3.CSCs作为潜在的肿瘤靶向治疗治理目标,研究其特征和调控机制对于开发靶向CSCs的治疗策略具有重要的临床转化意义。 综上所述,本研究将会为乳腺癌CSCs相关生物学问题的探究及临床治疗的发展提供新的思路和手段。