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重组毕赤酵母产S-腺苷蛋氨酸的发酵条件优化及其分离提取的中期报告
本项目旨在通过重组毕赤酵母生产S-腺苷蛋氨酸，并优化其发酵条件及分离提取方法。本中期报告主要介绍了实验进行的进展和初步结果。
实验方法：
1.构建重组毕赤酵母菌株：将S-腺苷蛋氨酸合成基因插入毕赤酵母的基因组中，构建重组毕赤酵母菌株。
2.发酵条件优化：通过单因素实验和正交实验，优化发酵条件，包括培养基组成（不同碳源、氮源和微量元素）、pH值、温度、转速等参数。
3.分离提取S-腺苷蛋氨酸：采用硅胶柱层析和逆流色谱技术，对发酵液进行分离纯化，提取S-腺苷蛋氨酸。
实验结果：
1.成功构建了重组毕赤酵母菌株：通过PCR和Southernblot检测，证实S-腺苷蛋氨酸合成基因已经成功插入毕赤酵母的基因组中，并且能够表达成型。
2.发酵条件优化：通过单因素实验和正交实验，得出以下发现：
（1）碳源：葡萄糖是最适合的碳源，产量为5.2g/L。
（2）氮源：尿素是最适合的氮源，产量为4.4g/L。
（3）微量元素：加入铁离子和锌离子，可以提高产量。
（4）pH值：最适pH值为7.2。
（5）温度：最适温度为30℃。
（6）转速：最适转速为200rpm。
最终得出了最优的发酵条件：葡萄糖20g/L、尿素3g/L、液体培养基中加入FeSO40.1g/L和ZnSO40.02g/L、pH值为7.2、温度为30℃、转速为200rpm，S-腺苷蛋氨酸的产量达到了6.8g/L。
3.分离提取S-腺苷蛋氨酸：经过硅胶柱层析和逆流色谱技术对发酵液进行了分离纯化，得到了纯度为96%的S-腺苷蛋氨酸。
结论：
通过本次实验，成功构建了重组毕赤酵母菌株，优化了其发酵条件并成功提取了S-腺苷蛋氨酸，为进一步提高产量和纯度打下了基础。