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Irisin抗尼古丁诱导的动脉粥样硬化的分子机制研究的开题报告
题目：Irisin抗尼古丁诱导的动脉粥样硬化的分子机制研究
摘要：动脉粥样硬化（Atherosclerosis）是一种慢性累积性血管病变，常见于老年人的冠心病等心血管疾病。尼古丁是环境中最普遍的毒品之一，很大程度上促进Atherosclerosis的进程。Irisin是一种发现不久的多肽激素，能够通过一些内分泌、代谢和神经途径对机体进行调节作用。本文旨在探究Irisin对尼古丁诱导的动脉粥样硬化模型中血管内皮细胞通透性、线粒体功能、细胞凋亡及氧化应激等分子机制的影响，以期为Atherosclerosis的治疗和预防提供新思路和新靶点。
关键词：动脉粥样硬化；Irisin；内皮细胞通透性；线粒体功能；细胞凋亡；氧化应激
一、研究背景
动脉粥样硬化（Atherosclerosis）是由于机体代谢紊乱，致使血管内层的脂质在介质膜下沉积、形成斑块，并逐渐堆积、变硬导致狭窄甚至闭塞，最终引起器官缺血、缺氧、萎缩等病理变化的一系列疾病，在心血管病方面具有重要性。
尼古丁是环境中最普遍的毒品之一，虽然尼古丁增强了大脑的注意力和快速记忆能力，但也是Atherosclerosis的常见致病因素之一。尼古丁对内皮细胞通透性和线粒体功能有负面影响，而且还会导致细胞凋亡及氧化应激等病理变化。
Irisin是一种发现不久的多肽激素，能够通过一些内分泌、代谢和神经途径对机体进行调节作用。Irisin不仅能促进脂肪分解、降低体重和血脂，并且还能通过激活AMPK、PGC-1α和Nrf2等信号通路，以增强线粒体功能和抗氧化应激能力。因此，本研究旨在分析Irisin对尼古丁诱导的动脉粥样硬化模型中内皮细胞通透性、线粒体功能、细胞凋亡及氧化应激等分子机制的影响。
二、研究内容
（一）研究设计
1、模型制备：采用invitro细胞实验中构建尼古丁诱导的动脉粥样硬化模型，建立含有不同浓度Irisin的实验组和对照组。
2、实验组处理：将神经胶质细胞分化指数为99%以上，细胞密度为1×105/ml的内皮细胞分为对照组和实验组。
3、评价指标：通过西方印迹、蛋白质质谱鉴定、细胞计数器、流式细胞术等方法评估Irisin对动脉粥样硬化模型中内皮细胞通透性、线粒体功能、细胞凋亡及氧化应激等分子机制的影响。
（二）研究方法
1、cell-CountingKit-8（CCK8）和细胞培养技术：根据CCK8试剂盒说明书对内皮细胞进行细胞活性测定，细胞在96孔板中培养至80%浓度，添加不同浓度的Irisin处理24小时，然后加入CCK8试剂，孵育后使用微孔板读取A450-540值，记录并分析其细胞增殖能力。悬浮培养内皮细胞以获得单个细胞，以进行流式细胞术。
2、Westernblotting：准备蛋白提取物，然后将样品通过SDS-PAGE电泳，转移至支持膜并使用抗体进行荧光检测。
3、蛋白质质谱鉴定：使用液质联用技术分离和鉴定蛋白质。
（三）数据分析
1、SPSS软件对实验数据进行正态性检验和方差分析。
2、使用热图可视化工具进行实验数据的可视化呈现。
三、研究意义
本研究课题旨在探究Irisin对尼古丁诱导的动脉粥样硬化模型中内皮细胞通透性、线粒体功能、细胞凋亡及氧化应激等分子机制的影响。研究结果将为临床治疗Atherosclerosis提供新靶点和新思路。