西花蓟马的SCAR分子检测技术.docx

西花蓟马的SCAR分子检测技术孟祥钦1闵亮13万方浩12周忠实12王文凯3张桂芬12基金项目：国家“973”计划项目（2009CB119200）；国家科技支撑计划项目（2006BAD08A14）；公益性行业（农业）科研专项（200803005）；国家自然科学基金项目（30971967）；中央财政国家重点实验室自主研究课题专项经费（SKL2007SR04）作者简介：孟祥钦男1983年12月生河南濮阳人硕士研究生研究方向为入侵生物学与分子生态学E-mail:[e-mail]通讯作者AuthorforcCorrespondenceingauthorE-mail:[e-mail]收稿日期Received：2009-11-25；接受日期Accepted：2010-01-31(1.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193；2.农业部外来入侵生物预防与控制研究中心北京100081；3.长江大学农学院湖北荆州434025)摘要：西花蓟马Frankliniellaoccidentalis(Pergande)是一种世界性入侵害虫寄主范围广危害严重2003年首次在我国发生危害并有进一步扩散蔓延的趋势。针对蓟马类害虫虫体微小、形态相似难以准确快速区分的问题采用特征序列扩增区域（SCAR）标记技术以西花蓟马及与之同域发生的其他种类蓟马为对象筛选出1对西花蓟马特异性引物（FOMF/FOMR）其扩增片段大小为320bp。种特异性检测结果显示该对引物只对西花蓟马的基因组DNA具有扩增能力对同域发生的花蓟马F.intonsa(Trybom)、禾花蓟马F.tenuicornis(Uzel)、烟蓟马ThripstabaciL.等41种蓟马不具有扩增效果。该对引物不仅对不同虫态的西花蓟马具有扩增能力而且在西花蓟马发生地的寄主植物组织内亦检测到了其卵的存在。同时该检测技术灵敏度高对成虫的最低检出阈值为1/160头。本检测技术在口岸检疫以及花卉、蔬菜和种苗调运中的害虫检测和监测中具有重要意义。关键词：西花蓟马；RAPD-PCR；SCAR；快速检测；特异扩增；检出阈值中图分类号:Q966文献标识码:A文章编号:0454-6296(2010)03-0000-00SCARmarkerforrapididentificationofthewesternflowerthripsFrankliniellaoccidentalis(Pergande)(Thysanoptera:Thripidae)MENGXiang-Qin1MINLiang13WANFang-Hao12ZHOUZhong-Shi12WANGWen-Kai3ZHANGGui-Fen12*(1.StateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPestsInstituteofPlantProtectionChineseAcademyofAgriculturalSciencesBeijing100193China;2.CenterforManagementofInvasiveAlienSpeciesMinistryofAgricultureBeijing100081China;3.AgricultureCollegeYangtzeUniversityJingzhouHubei434025China)Abstract:ThewesternflowerthirpsFrankliniellaoccidentalis(Pergande)isaworldwidepestcausingseriousdamagetoawiderangeofhostplants.ItwasfirstreportedinChinain2003withatrendoffurtherspreading.Mostofthripsspeciesaresmallinsizeandsimilarinmorphologywhichmakesithardtobedistinguishedquickly.InthepresentresearchapairofSCAR(sequencecharacterizedamplifiedregions)primers(F