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植物组织培养专题2动物细胞培养一、动物细胞培养的应用和概念:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(1)细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞贴壁过程(3)原代培养(primaryculture)定义:当原代培养的细胞生长停止,这时如果要使细胞继续生长,就要及时用胰蛋白酶等,使细胞从瓶壁上解离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养▲细胞株:传代细胞一般能传到40-50代,遗传物质一般不会发生改变,叫细胞株。细胞悬浮液1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等) 3、温度和PH 温度36.5+0.5度,pH7.2~7.4 4、气体环境 O2和CO2(95%空气和5%CO2)无菌操作问题3:为什么用胰蛋白酶处理?问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?5.动物细胞培养技术的应用:6、植物组织培养和动物细胞培养的比较:复习回顾二、动物体细胞核移植技术和克隆动物4、体细胞核移植过程---示动物克隆---无性繁殖供体细胞(供核)5.体细胞核移植技术的应用前景克隆动物的研究意义2-2动物细胞融合与 单克隆抗体一、动物细胞融合(细胞杂交) 诱导融合的方式 生物法:灭活的病毒诱导融合.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。) 化学法:聚乙二醇PEG诱导融合. 物理法:电激融合5、过程:6、意义: 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。动物细胞融合主要用于制备1.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于------------------------------() A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培 养成植株。2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是--------------------() A.细胞系B.细胞株 C.原代细胞D.传代细胞4、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞() A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强5.下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答: (1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自 ______________________。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ,然后用酶处理,这是为了使细胞 分散开来,这样做的目的是 (3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有 _______________________________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培 养到第代,到这时的培养称为_____________。 ⑷为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用处理 然后配置成,再分装。 ⑸在C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡, 原因是(2008宁夏)6.生物──选修3现代生物科技专题(15分)回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的。此时,瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是。 (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞,该种细胞的黏着性,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量。(2007宁夏)7.B.生物——选修3现代生物科技专题现有A和B两个肉牛品种,A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质,B品种牛则为B细胞核、B细胞质。 (1)如果要获得一头克隆牛,使其细胞由A细胞核和B细胞质组成,基本步骤是,从A品种牛体内取出体细胞,进行体外培养。然后再从培养细胞中取出___________注入B品种牛的_______卵母细胞,经过某处刺激和培养后,可形成胚胎,该胚胎被称为___ ____,将该胚胎移入代孕母牛的_____________中,通过培育可达到目的。二、单克隆抗体克隆接受抗原刺激后,能分泌针对该抗原的特异性抗体,在体液免疫中具有重要功能。 B淋巴细胞本身是一种终末分化细胞,通常不再进行细胞分裂,存活一段时间后便会死亡——短命细胞骨髓瘤细胞单克隆抗体的制备—极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖