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动物细胞工程提问:动物细胞培养2.2.1动物细胞培养和核移植技术教学目标重点 动物细胞培养的过程及条件。 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 难点 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 皮肤烧伤,如果创面很小(不大于硬币)只要保持清洁,甚至深度烧伤,也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大,常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片,可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位(自体植皮),也可取自其他活人或尸体(异体植皮)等。自体植皮是永久性的,取自其他人或动物的植皮是暂时性的,是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施,10~14天后就要被身体排斥。烧伤病人图片人耳鼠1、概念(一)、动物细胞培养过程1、有关概念:在传代培养过程中 10代以前的细胞核型不变 10~50代,增殖逐渐减慢,以至于完全停止,部分细胞的细胞核型可能发生改变 50代以后的部分细胞发生突变,获得不死性,朝着等同于癌细胞的方向发展。有关概念细胞悬浮液取动物动的组织块归纳 过程强调一:细胞贴壁过程■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。思考题:3、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?归纳 过程多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,思考并讨论下列问题? 1、体外培养细胞时需要哪些提供那些物质? 2、体外培养的细胞需要什么样的环境条件?1、无菌、无毒的环境(先对培养液、培养器具无菌处理;添加一定量的抗生素,防止污染;定期更换培养液,清除代谢产物) 2、营养 糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素等(合成培养基);通常需加血清或血浆等天然成分。与植物培养基相比其特点是: 3、温度和PH 36.5+(-)0.5度,7.2-7.4 4、气体环境: O2和CO2(95%空气和5%CO2) 提醒①CO2作用——调节培养基pH; ②O2作用——细胞有氧呼吸,细胞代谢必需 ③所用装置—— 培养皿或松盖培养瓶+培养箱。植物组织培养和动物细胞培养的比较(三)动物细胞培养技术的应用二.动物细胞核移植技术和克隆动物(一)、体细胞核移植的过程: 2.核移植的受体细胞 9.移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不100%相同的原因(二)、体细胞核移植技术的应用前景:(三)、体细胞核移植技术存在的问题:思考与探究3.1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达(Lucinda)的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。 (1)能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗?请说明理由。 (2)如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你,你将如何对它进行克隆? 4.体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么问题?请你查阅资料,了解这方面的前沿动态。2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是() A.获得不死性的细胞B.10代以内细胞 C.原代细胞D.传代细胞3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是:() A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中 D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变4、一般说来,动物细胞体外培养需要满足以下条件()5、动物细胞培养的特点() ①细胞贴壁②有丝分裂③细胞分化④接触抑制⑤减数分裂⑥原代培养一般传1-10代 A、①②④⑥B、②③④⑤ C、①③④⑥D、③④⑤⑥6、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答: (1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是,然后用酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是。 (3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第代。 (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用 处理,然后配置成,再分装。 `