高通量药物筛选与创新药物研究.pptx

会计学内容化合物资源分子生物学
细胞生物学
基因组学
蛋白组学高通量筛选（HTS）TheEvolutionofHTS高通量筛选高通量筛选的四个要素要素一：高通量筛选模型建立选择高通量筛选的靶点CurrentDrugTargets靶点确证模型设计体外生化检测显色反应(Photometry)显色反应方法检测MetAP活性显色反应方法检测MetAP活性荧光强度(FluorescenceIntensity)FluorogenicPeptideSubstrate荧光偏振(FluorescencePolarization)FP尺寸变化IMAPProtein-DNABindingFPHTSSer/ThKinaseCompetitiveFPAssay荧光共振能转移(FRET)FluorescenceResonanceEnergyTransfer(FRET)荧光共振能转移Fluorogenic(Quenched)SubstrateFRET时间分辨荧光共振能传递（TimeResolvedFRET）LANCEAssayforKinaseLANCEAssayforTransferaseandNuclearreceptorLANCEAssayforProteaseandHelicaseAlphaScreenAlphaScreenforPIP3AlphaScreenforcAMPBRET闪烁亲近检测法(ScintillationProximityAssay,SPA)FlashPlate-SPAwithoutBeads常用的蛋白水解酶检测方法常用的蛋白水解酶检测方法常用的激酶检测方法常用的磷酸酯酶检测方法以酶为靶点细胞水平检测荧光成像检测(FLIPR)FLIPRfunctionalscreeningassay报告基因QuantumdotsHighContentScreeningHighContentScreeningLivecellassaystodetecttranslocationofsignalingproteins:
primaryscreening
leadprofiling
Pathwayscreeningforfunctionaleffect,ratherthanspecificmodeofaction(e.g.:invitrobinding,catalyticactivity).
Modulationofproteintranslocationisanalternativetoinhibitionofcatalyticactivity:proteintranslocationmodulators.ProteinTranslocationisEssentialforIntracellularSignalingGFPFusionProteinsforDetectingTranslocationsMembranetoCytoplasmTranslocationCytoplasmtoNucleusTranslocationVesicletoPlasmaMembraneTranslocationCytoplasmtoMembraneTranslocation要素二：化合物样品库制备Lipinski规则Propertiesofan“Average”DrugUndesirableCompounds筛选样品来源传统化学合成和分离组合化学特点：
化合物数量大，相对结构多样性
易于设计、合成---100,000compounds(andmore!)inayearwithafewchemistsandautomation
SAR的产生
Drug-like？
发掘天然产物资源天然化合物库（NatureProductPool）天然产物对新药发现和开发的重要性为什么自然界能产生对人体疾病有效的物质？为什么20世纪后半叶对从天然产物寻找新药失去了兴趣？天然产物研究的复活根据新药的研发过程设计有效的天然产物研究方法天然产物或其类似物作为药品实例洛伐他汀(Lovastatin)(HMG-CoA抑制剂）环孢菌素A（CyclosporineA）紫杉醇喜树碱及其衍生物吗啡生物碱天然产物研究的未来Galanthamine四环骨架化合物库的建立和分泌途径抑制剂及高尔基-质膜运输抑制剂SecramineA的发现CompoundStorageCompoundplatesSamplemanagementtechnologySamplemanagementtechnology要素三：自动化微孔板（Microplate）MicroplatesMicroplatesfromCorningMatrixofWellsMicroplatesMicroplatesMicroplates微孔板设备Hist