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bFGF促进高糖抑制血管内皮细胞迁移机制研究的任务书 任务书 一、研究背景 糖尿病是一种常见的代谢性疾病,其患病率逐年上升。研究表明,高糖状态下,血管内皮细胞的迁移受到抑制。而血管内皮细胞迁移在血管损伤修复、肿瘤血管生成等生理和病理过程中起到重要作用。因此,研究高糖对血管内皮细胞迁移的影响及相关机制,对于深入了解糖尿病肾病等疾病的发病机制具有重要意义。 另一方面,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为一种细胞因子,对于血管内皮细胞迁移有一定的促进作用。研究bFGF在高糖状态下对血管内皮细胞迁移的影响及机制,可以为开发相关治疗药物提供理论支持。 二、研究目的 本研究旨在探究高糖状态下bFGF对血管内皮细胞迁移的促进作用及其机制,为深入了解糖尿病肾病等疾病的发病机制、发展相关治疗药物提供理论基础。 三、研究内容与方法 1.研究内容 本研究将从以下几个方面展开研究: (1)建立高糖在体外培养模型 选取人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行实验,通过不同质量浓度的葡萄糖诱导,建立相应的高糖培养模型。 (2)检测高糖对HUVEC迁移的影响 采用Transwell小室实验、scratch伤口实验等方法,检测不同高糖浓度下HUVEC细胞迁移的情况,通过比较迁移率、伤口闭合速度等指标,分析高糖对HUVEC迁移的影响。 (3)探究bFGF促进HUVEC迁移的机制 通过添加不同浓度的bFGF对高糖培养下的HUVEC进行处理,观察其对HUVEC迁移的促进作用。同时,通过Westernblotting、ELISA等方法检测bFGF对相关信号通路的调控作用。 2.研究方法 (1)细胞培养:选取HUVEC,以DMEM培养基为基础,加入相应的葡萄糖浓度、FBS等生长因子,进行细胞培养。 (2)Transwell小室实验:将HUVEC细胞移植至Transwell小室中,通过不同条件的处理,观察HUVEC迁移情况。 (3)Scratch伤口实验:将细胞培养至80%的密度,用200μl尖口吸管刮出一条直线形的伤口,然后进行相应的处理。 (4)Westernblotting:通过蛋白质电泳等方法检测相关信号通路的调控作用。 (5)ELISA:通过Enzyme-linkedimmunosorbentassay检测相关蛋白及细胞因子的含量。 三、进度安排 拟于2021年9月至2022年3月完成研究任务,具体进度安排如下: (1)9月-10月:建立高糖培养模型,完成Transwell小室实验。 (2)11月-12月:完成Scratch伤口实验,开始探究bFGF促进HUVEC迁移的机制。 (3)1月-2月:进行Westernblotting等方法检测bFGF对相关信号通路的调控作用,综合分析实验数据。 (4)3月:完成论文撰写及口头答辩。 四、参考文献 1.ZhangW,SunR,LiMX,etal.HighglucoseinhibitsvascularendothelialcellmigrationbydownregulatingtheSry-relatedhigh-mobilityboxprotein18(Sox18)expressio。n[J].IntJMolSci,2013,14(11):22110-22126. 2.KucinskienėZA,ŠimkienėA,KėvelaitisE,etal.BasicfibroblastgrowthfactorinhumanHUVECcellcultureanditseffectsoncellmigration[J].Medicina,2016,52(4):247-253. 3.ZhangCX,YanXJ,GaoYD,etal.Basicfibroblastgrowthfactorpromoteshumanhematopoieticcellmigrationindependentlyofitseffectsonproliferation[J].ExpHematol,2012,40(4):285-294. 4.ZhuB,ZengQ,ZhouC,etal.Highglucoseinhibitsvascularendothelialgrowthfactorreceptor-mediatedexpressionofangiopoietin-1and-2bymicroRNA-200cinhumanretinalendothelialcells[J].MolVis,2014,20:1311-1321.