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弓形虫SAG1-MIC8复合基因疫苗对小鼠的免疫保护性研究的任务书
任务书
研究主题：弓形虫SAG1-MIC8复合基因疫苗对小鼠的免疫保护性研究
研究背景：弓形虫病是一种由弓形虫引起的寄生虫病，严重威胁人类和动物的健康。弓形虫感染后，病人常常会出现发热、头疼、肌肉疼痛、乏力等症状，严重的还会导致神经系统、心脏、肝脏、脾脏、肺脏等器官受损。弓形虫感染需长时间治疗，并具有易复发和后遗症的特点。
因此，研究一种有效的防治弓形虫疾病的方法，对于提高人类和动物的健康水平具有重要意义。
研究内容：通过构建弓形虫SAG1-MIC8复合基因疫苗，注射到小鼠体内，观察疫苗的免疫保护性能力。主要包括以下几个方面：
1.构建弓形虫SAG1-MIC8复合基因的表达质粒。
2.利用重组质粒转化E.coliBL21(DE3)进行大规模纯化表达。
3.建立小鼠弓形虫感染模型并注射SAG1-MIC8复合基因疫苗，观察小鼠体内免疫应答和保护性能力。
4.通过ELISA、Westernblot等方法，检测小鼠血清中特异抗体水平和免疫原的表达情况。
5.收集小鼠分泌物、组织样本，进行细胞免疫学检测，观察免疫反应的类型及水平。
6.进行实验数据的收集、整理、分析，得出研究结论。
研究意义：本研究将有助于探索一种防治弓形虫疾病的新方法，通过构建全新的弓形虫SAG1-MIC8复合基因疫苗，为防控弓形虫病提供一种新思路。
同时，本研究将全面探究弓形虫SAG1-MIC8复合基因疫苗的免疫保护性能力，审视其在阻止弓形虫感染上的潜力，并可能为人类和动物的弓形虫疾病控制提供了重要的实验依据。
研究计划：
第1年：
1.熟悉弓形虫基因工程、分子生物学相关实验技术，进行实验设计和方案制定。
2.构建弓形虫SAG1-MIC8复合基因的表达质粒。
3.利用PCR检测所得表达质粒，构建正确的弓形虫SAG1-MIC8复合基因工程菌。
第2年：
1.建立小鼠弓形虫感染模型，进行小鼠感染实验，确认病毒感染。
2.注射SAG1-MIC8复合基因疫苗，观察免疫应答和保护性能力。
第3年：
1.收集小鼠分泌物、组织样本，进行免疫学检测，观察免疫反应的类型及水平。
2.实验数据的收集、整理、分析，得出研究结论。
预期成果：
1.构建和表达正确的弓形虫SAG1-MIC8复合基因工程菌。
2.验证SAG1-MIC8复合基因疫苗的免疫保护性能力和安全性。
3.形成小鼠体内的免疫应答和免疫保护性实验数据，鉴定研究结果。
参考文献：
[1]GuinazuN,CappaSM,DiGenaroMS,etal.InductionofprotectionagainstTrypanosomacruzibyvaccinationwithsequencesofT.cruzikDNAandSAG1proteinsinaliposomalplatform.Vaccine.2012;30(15):2738-43.
[2]ButterworthAE,StephensonLS,TothTE,etal.Immunityintheguinea-pigtoSchistosomamansoni:protectionbyirradiatedcercariaeandidentificationofaproteinfractionimmunologicallyrelatedtothecirculatinganodicantigen.Parasitology.1975;71(1):43-53.
[3]MuhlnickelCJ,SchwarkAL,GratzlS,etal.ExploringToxoplasmagondii'sdensegranuleproteinGRA2asanovelgeneticvaccinecandidateagainsttoxoplasmosisinmice.ParasitolRes.2017;116(5):1429-1442.