AKR1C1在非小细胞肺癌转移中的作用及机制研究的任务书.docx

AKR1C1在非小细胞肺癌转移中的作用及机制研究的任务书
任务书
一、研究背景
非小细胞肺癌是目前全球最常见的恶性肿瘤之一，占据了所有肺癌病例的85%以上。肺癌的远处转移是影响其预后和治疗效果的主要因素之一，但其发生机制仍不十分清楚。AKR1C1是一种酮还原酶，已经证实在胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤中具有重要作用。本研究旨在探究AKR1C1在非小细胞肺癌转移中的作用及机制，为深入了解肺癌转移提供新思路和解决方案。
二、研究目的
1.确定AKR1C1在肺癌的远处转移过程中的表达情况。
2.研究AKR1C1基因沉默对非小细胞肺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。
3.探究AKR1C1参与非小细胞肺癌细胞远处转移的分子机制。
4.构建AKR1C1的包装腺病毒并应用于肺癌细胞体内实验，分析其在肿瘤转移中的潜在作用。
三、研究内容
1.采用qRT-PCR和Westernblot检测AKR1C1在肺癌组织和非小细胞肺癌细胞系中的表达水平，探究其与非小细胞肺癌患者生存率的相关性。
2.利用siRNA技术沉默AKR1C1基因，观察其对非小细胞肺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响，形态学观察细胞的形态变化。
3.运用RNA测序技术分析AKR1C1沉默后非小细胞肺癌细胞的基因表达谱，筛选出差异表达的基因，进一步分析差异表达基因的功能和生物过程富集。
4.针对RNA测序分析结果，利用RT-PCR、Westernblot等方法验证所筛选出的差异表达基因，分析其与AKR1C1在非小细胞肺癌远处转移中的相互作用。
5.应用CRISPR-Cas9技术，构建AKR1C1敲除的非小细胞肺癌细胞系，以验证AKR1C1表达与非小细胞肺癌细胞远处转移的关系。
6.构建AKR1C1的包装腺病毒，在体内实验中应用该包装腺病毒，观察其在肺癌细胞体内的作用及机制。
四、研究意义
1.为深入了解肺癌的远处转移机制提供新思路和解决方案。
2.探究AKR1C1在非小细胞肺癌远处转移中的作用及机制，为目前没有有效的抗转移治疗提供新的靶向。
3.揭示了AKR1C1基因沉默对非小细胞肺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响，提供了为设计肺癌的抗转移治疗策略提供了方向。
4.利用RNA测序技术分析差异表达基因的功能和生物过程富集，为了解细胞生物学过程提供新思路。
5.借助AKR1C1的包装腺病毒，为将来开发肺癌的基因治疗提供可行性研究。
五、拟定进度安排
1.前期调研及文献阅读（1周）。
2.采集肺癌患者肿瘤样本并检测AKR1C1表达水平（2周）。
3.建立非小细胞肺癌细胞系并获取其AKR1C1表达情况（1周）。
4.应用siRNA技术沉默AKR1C1基因，观察细胞的形态变化及其对非小细胞肺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响（4-6周）。
5.进行RNA测序分析及基因功能富集分析（3周）。
6.验证RNA测序分析的结果，包括差异表达基因、分子机制等，进行RT-PCR、Westernblot等方法的实验操作（4-6周）。
7.利用CRISPR-Cas9技术构建AKR1C1敲除的非小细胞肺癌细胞系并验证AKR1C1敲除对细胞远处转移的影响（4-6周）。
8.构建AKR1C1的包装腺病毒并进行体内实验操作（4-6周）。
9.数据整理和统计分析，撰写研究论文（4周）。
六、预期成果
1.论文2篇，其中1篇发表在SCI检索期刊。
2.研究结果可为深入了解肺癌转移机制提供新思路和解决方案，为肺癌转移的治疗提供新的靶向。
3.揭示了AKR1C1基因沉默对非小细胞肺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响，为设计肺癌的抗转移治疗策略提供了方向。
4.探究了AKR1C1参与非小细胞肺癌细胞远处转移的分子机制，在前瞻性治疗方面具有开发潜力。
5.构建AKR1C1的包装腺病毒并进行体内实验操作，为肺癌基因治疗提供可行性研究。