鸭卵清溶菌酶的分离纯化及部分性质与功能基团研究的任务书.docx

鸭卵清溶菌酶的分离纯化及部分性质与功能基团研究的任务书
任务书
一、研究背景及意义
溶菌酶是一类能够水解细菌细胞壁的酶，具有广泛的应用前景。其中，鸭卵清溶菌酶作为一种具有高度特异性和效力的溶菌酶，被广泛应用于农业、食品工业、医药等领域。在此基础上，鸭卵清溶菌酶的分离纯化及部分性质与功能基团研究成为了当前的热点问题。
二、研究目的和内容
本研究旨在：利用多种手段对鸭卵清中的溶菌酶进行分离纯化，并对其部分性质与功能基团进行研究，为鸭卵清溶菌酶的应用提供科学依据。
1.鸭卵清溶菌酶的提取和分离纯化
1）浸出液的制备
采用醋酸盐缓冲溶液（pH=5.0）浸泡鸭卵清，使溶菌酶释放，浸渍时间为24h。
2）溶菌酶的提取
采用超声波法和冷冻-融化法进行鸭卵清中的溶菌酶提取。
3）离子交换层析
采用DEAE-52阴离子交换树脂进行溶菌酶的纯化。
4）凝胶过滤层析
采用SephadexG-100凝胶进行溶菌酶的进一步分离纯化。
2.鸭卵清溶菌酶的部分性质及功能基团研究
1）测定酶活力
利用酶促反应法，测定鸭卵清溶菌酶的酶活力。
2）分子量测定
采用凝胶过滤色谱法测定鸭卵清溶菌酶的分子量。
3）等电点测定
采用等电聚焦电泳法（IEF）测定鸭卵清溶菌酶的等电点。
4）催化机理研究
采用催化效率的测定方法，研究鸭卵清溶菌酶的催化机理。
5）功能基团研究
采用傅里叶变换红外光谱（FTIR）对鸭卵清溶菌酶的功能基团进行研究。
三、研究计划
1.文献查阅和实验设计（1周）
1）对鸭卵清溶菌酶相关领域内的研究现状进行了解和分析。
2）了解选材、试剂的来源并制定实验方案。
2.鸭卵清中溶菌酶的提取和分离纯化(4周)
1）醋酸盐缓冲液浸泡：1周。
2）溶菌酶的提取：1周。
3）DEAE-52阴离子交换树脂层析：1周。
4）SephadexG-100凝胶层析：1周。
3.鸭卵清溶菌酶的部分性质及功能基团研究（4周）
1）酶活力的测定：1周。
2）分子量测定：1周。
3）等电点测定：1周。
4）催化机理研究：1周。
5）功能基团研究：1周。
4.结果分析与讨论（1周）
对实验结果进行分析和整理，撰写报告，并进行相关讨论。
五、预期成果
本研究预期将完成鸭卵清溶菌酶的分离纯化及部分性质与功能基团研究，提出其催化机理并应用于相关领域，预期可以为溶菌酶的潜在应用奠定基础。
参考文献：
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