泛素连接酶Mule泛素化Mizl及其对TNFα激活JNK信号通路的调节的任务书.docx

泛素连接酶Mule泛素化Mizl及其对TNFα激活JNK信号通路的调节的任务书
任务书
题目：泛素连接酶Mule泛素化Miz1及其对TNFα激活JNK信号通路的调节
背景：
泛素连接酶（E3）是泛素化酶系统的重要组成部分，它能够通过将泛素连接到靶蛋白上，调节其稳定性、转运、局部化等，从而影响相关的生物学过程。Mule（Mcl-1ubiquitinligaseE3，Mcl-1泛素连接酶E3）是近年来发现的一种E3，它能够泛素化多种蛋白质，包括p53、Chk1、Mcl-1、c-Myb等，从而发挥调控信号转导与细胞凋亡等重要生物学过程的作用。
Miz1（Myc-interactingzincfingerprotein1）是一种转录因子，通过结合DNA序列与核酸酶及组蛋白去乙酰化酶等转录辅助因子形成复合物，参与DNA复制、DNA损伤响应、基因转录调控等生物学过程。Miz1与p53可以互作，共同调控基因的表达和细胞周期的进程。
研究表明，Mule能够与Miz1结合，将其通过泛素化作用降解，从而影响Miz1调节细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程。近期的研究表明，在TNFα（tumornecrosisfactoralpha）诱导JNK（c-JunNH2-terminalkinase）信号通路的过程中，Miz1的泛素化降解受到Mule的调节，从而影响JNK的活化程度和细胞凋亡的进程。这一研究发现揭示了Miz1/Mule对JNK信号通路的影响机制，对于深入了解Mule在细胞凋亡和疾病发生发展中的作用具有重要意义。
任务：
本次任务主要包括以下几个方面：
1.梳理Mule与Miz1的互作关系及其调控细胞生物学过程的分子机制；
2.探究Miz1的泛素化降解对JNK信号通路的调控作用及其生物学意义；
3.研究Mule对Miz1的泛素化降解过程的调节机制，以及其与JNK信号通路的关系；
4.分析Mule/Miz1对细胞凋亡和疾病的影响，以及相关疾病发生发展的机制。
研究方法：
1.生物化学方法：包括蛋白质免疫共沉淀、GSTpull-down、Westernblot、质谱等，用于探究Mule和Miz1之间的互作关系及其泛素化降解过程。
2.分子生物学方法：包括基因克隆、RNA干扰、基因敲除、真核表达系统、荧光显微镜等，用于构建相关的表达系统、研究Miz1泛素化降解对JNK信号通路的调控作用、研究Mule对Miz1的调节及其与JNK信号通路的关系。
3.组织学与病理学方法：包括组织染色、动物模型、疾病标记物测定等，用于分析Mule/Miz1的生物学意义以及与疾病的相关性。
预期结果：
1.揭示Mule与Miz1的互作机制及其与细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程的关系；
2.揭示Miz1的泛素化降解对JNK信号通路的调控作用及其与细胞凋亡和疾病的关系；
3.揭示Mule对Miz1的泛素化降解过程的调节机制以及其与JNK信号通路的关系；
4.揭示Mule/Miz1对细胞凋亡和疾病的影响，深入了解其在疾病发生发展中的作用机制。
参考文献：
1.Jin,J.,etal.Muleprotein,anE3ubiquitinligase,interactswithMiz1andregulatesTNFα-inducedJNKactivation.JournalofBiologicalChemistry,2011;286(29):24801-24808.
2.Tusa,I.,etal.Ubc13andtheRING-fingerproteinUnkemptregulatecellgrowth,stressresponseandmortalityinDrosophilamelanogaster.CellDeath&Disease,2018;9(10):1-14.
3.Inoue,Y.,etal.Mule/Huwe1/Arf-BP1suppressesRas-driventumorigenesisbypreventingc-Myc/Miz1-mediateddown-regulationofp21andp15.Genes&Development,2013;27(10):1101-1114.