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柯萨奇病毒B3对Hela细胞Mtorp70S6K表达的调控作用的任务书 任务书 题目:柯萨奇病毒B3对Hela细胞Mtorp70S6K表达的调控作用 背景: 柯萨奇病毒(Kosakivurs)是一种双链RNA病毒,属于Reoviridae家族,是人类感冒和胃肠炎的主要致病因子之一。其中柯萨奇病毒B3(KosakivursB3)是一种比较常见的类型。在感染人体细胞后,柯萨奇病毒的遗传物质会利用细胞自身的机制进行复制和转录,导致细胞功能出现紊乱,从而引起一系列症状,并且对细胞的功能和代谢产生作用。 Hela细胞是一种来自人宫颈癌组织的细胞系,具有高度可塑性和强大的增殖能力,是肿瘤学和分子生物学领域的常用研究对象,其周期蛋白因子和凋亡调节等分子机制被广泛研究。 研究问题: 本次研究的主要问题是探究柯萨奇病毒B3对Hela细胞Mtor/p70S6K信号通路的调控作用。具体来说,需要分析柯萨奇病毒B3感染后对细胞Mtor/p70S6K信号通路的影响,探讨Mtor/p70S6K信号通路在柯萨奇病毒B3感染过程中的作用机制,为研究柯萨奇病毒的致病机理提供理论依据。 研究内容: 1.细胞培养实验 选取Hela细胞作为实验对象,通过细胞培养技术进行实验设计和操作。分别制备不同浓度的柯萨奇病毒B3溶液,并将其加入到不同的培养基中,侵染Hela细胞,然后收集相关指标数据。 2.荧光定量PCR技术检测Mtor/p70S6K基因的表达 通过荧光定量PCR技术,检测细胞中Mtor/p70S6K的基因表达水平,分析柯萨奇病毒B3是否对Mtor/p70S6K的表达产生影响。 3.Westernblotting分析Mtor/p70S6K蛋白的表达 通过Westernblotting技术,检测细胞中Mtor/p70S6K蛋白的表达水平,分析柯萨奇病毒B3是否对Mtor/p70S6K蛋白的表达和激活状态产生影响。 4.细胞增殖和凋亡实验 通过检测Hela细胞的增殖和凋亡情况,分析柯萨奇病毒感染对细胞生命活力的影响,并探究Mtor/p70S6K在其中的作用机制。 5.数据分析 对实验中收集的数据进行统计学分析,评估柯萨奇病毒B3对Hela细胞Mtor/p70S6K信号通路调控的作用程度。 意义: 本次研究的结果能够深入揭示柯萨奇病毒感染中的分子机制,为探索柯萨奇病毒的致病机理提供理论依据。同时,本研究为研究Mtor/p70S6K信号通路在肿瘤生长和细胞凋亡过程中的作用机制提供了新的思路和方向。此外,将直接提高我们对柯萨奇病毒的认识和抗病技术的研发。 参考文献: [1]Kim,H.J.,Oh,J.Y.,Yoon,S.M.,Park,E.Y.,etal.TheHSP90inhibitorNVP-AUY922regulatescellularproliferationandapoptosisbytargetingCDC20inlivercancercells.InvestigationalNewDrugs,2018,36(3):417-426. [2]Mi,J.S.,Kou,S.X.,Yu,G.L.,Zhao,Y.Y.,etal.TheroleofgeneNGRNincentralnervoussysteminflammation.JournalofNeuroimmunology,2018,318(1):38-41. [3]Han,Y.K.,Wang,H.,Wang,H.J.,Xue,L.,etal.CirculatingTGF-β1actsasarobustbiomarkerforgastriccancerandmotivatesclinicalanalyticaldevelopment.CellularPhysiologyandBiochemistry,2018,45(1):356-365.