巴氏新小绥螨对甲氰菊酯抗性分子机理研究的任务书.docx

巴氏新小绥螨对甲氰菊酯抗性分子机理研究的任务书
任务书
一、研究背景
巴氏新小绥螨（Panonychuscitri）是一种重要的花椒、橙子等柑橘类果树的害虫。甲氰菊酯是目前广泛使用的一种控制巴氏新小绥螨的杀虫剂。然而，近年来在柑橘园中已经发现巴氏新小绥螨对甲氰菊酯出现了抗性，造成了严重的损失。因此，有必要对巴氏新小绥螨对甲氰菊酯抗性分子机理进行研究。
二、研究目的
本研究旨在探究巴氏新小绥螨对甲氰菊酯抗性的分子机理，为甲氰菊酯的应用提供科学依据，同时为寻求巴氏新小绥螨的新型防治方法提供理论基础。
三、研究内容
1.采集巴氏新小绥螨对甲氰菊酯敏感和抗性种群，建立各自的生物学特性记录档案。
2.采用甲氰菊酯选择法，通过比较敏感种群和抗性种群的DDT酯酶、丙二醛酸脱氢酶、肌酸激酶、谷胱甘肽S转移酶等代谢酶的活性，确定抗性的分子机理。
3.通过转录组和代谢组技术，分析敏感种群和抗性种群巴氏新小绥螨对甲氰菊酯响应的基因和代谢物差异，寻找抗性的可能基因靶点和代谢途径。
4.应用膜片片段来源点突变技术（MS-HRM）和碱基-特异性nuclease（TALEN）技术，检测巴氏新小绥螨线粒体基因突变和有无抗性相关基因突变，验证抗性分子机制。
四、研究意义
通过对巴氏新小绥螨对甲氰菊酯抗性分子机理的研究，可以深入了解抗性的机理，为甲氰菊酯的应用提供科学指导和参考。同时，为选择和设计新型防治手段提供理论支撑。
五、研究方案
1.样本采集：从不同柑橘果树中收集巴氏新小绥螨样本，根据甲氰菊酯敏感性和抗性情况建立生物学特性记录档案。
2.酶活性分析：根据抗性情况选取敏感种群和抗性种群，利用DDT酯酶、丙二醛酸脱氢酶、肌酸激酶、谷胱甘肽S转移酶等代谢酶的活性变化，探究抗性的分子机理。
3.转录组和代谢组分析：采用RNA-seq、LC-MS等技术，比较敏感种群和抗性种群相对表达和代谢物谱的差别，寻找差异表达的基因和代谢物。
4.突变验证：采用MS-HRM和TALEN技术，验证突变是否存在，并确定突变与抗性的关系。
六、研究预期成果
1.建立巴氏新小绥螨抗性与敏感种群的生物学特性记录档案。
2.揭示抗性巴氏新小绥螨与敏感种群在代谢酶活性和转录组、代谢组水平的差别。
3.寻找可能的抗性基因靶点和代谢途径，为新型防治方法的开发提供理论基础。
4.验证巴氏新小绥螨突变基因与抗性的关系，深入了解抗性分子机理。
七、研究经费
研究总经费为100万元人民币，其中包括实验设备费用、试剂费用、专家咨询费用、出差费用等。
八、研究时间安排
本研究计划为期3年，具体时间安排如下：
第一年：样本采集、酶活性分析、RNA和代谢物组的制备；
第二年：转录组和代谢组分析、突变验证；
第三年：研究总结、论文撰写、成果转化等。
九、研究团队和专家组成
1.研究团队成员：
组长：某某，博士，教授，从事巴氏新小绥螨研究15年，主要研究方向为害虫的生态与化学控制。
副组长：某某，博士，副教授，从事线虫研究10年，主要研究方向为转录组和代谢组分析。
研究人员：某某，硕士，研究助理，主要负责样品的处理和实验的开展。
2.专家咨询组成员：
-某某，中国农业科学院副研究员，从事昆虫分子生态学研究。
-某某，中国科学院动物研究所研究员，从事昆虫生理生化学研究。
-某某，浙江省柑橘病虫害防治站站长，从事柑橘病虫害防治工作。
十、研究成果运用方案
1.发表论文：在相关SCI杂志上发表不少于3篇研究论文，用于学术交流和推广。
2.申请专利：根据研究成果申请相关专利，为新型防治方法的开发提供保障。
3.知识产权转化：将研究成果向上级领导、相关部门如农业部、农业技术推广站、农药生产企业等单位进行宣传推广，争取研究成果的知识产权转化。