超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的实验研究的任务书.docx

超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的实验研究的任务书
任务书
一、任务背景
椎间盘是连接相邻脊椎的骨板软骨结构，由纤维环和髓核组成。椎间盘的退行性变是导致腰椎间盘突出症、椎间盘软化、椎间盘疝等多种疾病的原因之一。目前，常用的治疗手段包括药物治疗、物理治疗、手术治疗等，但都有一定的局限性和风险。
近年来，超声微泡介导基因治疗作为一种新兴的治疗手段，备受关注。该技术通过超声微泡将目标基因转染到靶细胞内，从而实现治疗效果。其中，双报告基因是一种广泛应用于基因治疗研究的报告基因，在椎间盘疾病领域也有广阔的应用前景。
本次实验旨在探究超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的情况，为椎间盘疾病的基因治疗提供实验依据。
二、任务目标
1.熟悉超声微泡介导基因治疗技术及其应用；
2.熟悉椎间盘髓核的结构和功能特点；
3.掌握双报告基因的表达检测技术，并验证其在椎间盘髓核中的表达情况；
4.掌握椎间盘髓核细胞的分离、培养、转染和检测技术；
5.分析超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的影响因素。
三、任务内容
1.执行椎间盘髓核细胞的分离、培养、转染和检测实验；
2.分析超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的情况；
3.设计实验方案并撰写实验报告；
4.对实验结果进行统计学分析，并撰写数据分析报告。
四、任务步骤
1.收集相关文献资料，熟悉超声微泡介导基因治疗技术及双报告基因的表达检测技术；
2.分离椎间盘髓核并进行细胞培养；
3.转染含双报告基因的超声微泡到椎间盘髓核细胞中，并对转染效率进行测定；
4.利用实时荧光定量PCR技术检测双报告基因在椎间盘髓核中的表达情况；
5.对实验结果进行统计学分析，探究超声微泡介导双报告基因表达的影响因素；
6.撰写实验报告和数据分析报告。
五、预期成果
1.掌握超声微泡介导基因治疗技术、双报告基因的表达检测技术和椎间盘髓核细胞的分离、培养、转染和检测技术；
2.获得超声微泡介导双报告基因在椎间盘髓核中表达的实验数据；
3.对超声微泡介导双报告基因表达的影响因素进行分析；
4.撰写实验报告和数据分析报告，具有一定的科研价值和学术价值。
六、参考文献
1.Zhang,W.,Yan,Z.,Li,X.,etal.(2017).Theapplicationofgenetherapyinthetreatmentofintervertebraldiscdegeneration.CurrentStemCellResearch&Therapy,12(5),383-389.
2.He,J.,Sun,Z.,Fan,Z.,etal.(2017).ThereportgenesystemSox9/TetOnintegratedwiththebiphasicSilkscaffoldsfortheregulatedosteochondraldifferentiationofBMSCs.Actabiomaterialia,54,60-71.
3.Huang,H.,Zhang,L.,Liu,Y.,etal.(2016).Tissue-engineeredintervertebraldisccomposedofhumannucleuspulposusandannulusfibrosuscellsderivedfrommesenchymalstemcellsseededonasilkfibroin/polycaprolactonescaffoldinvitro.Journalofbiomedicalmaterialsresearch.PartA,104(6),1462-1471.