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麦冬OjERF基因的克隆与功能研究的任务书
任务书
项目名称：麦冬OjERF基因的克隆与功能研究
研究目的：
1.克隆麦冬OjERF基因的全长序列，确定其基因组结构和表达方式。
2.通过生物信息学分析，预测麦冬OjERF基因的分子结构和功能。
3.研究麦冬OjERF基因在逆境应答中的作用机制，探讨其调节型状况。
4.探究麦冬OjERF基因与其他基因间的相互作用关系，为麦冬遗传改良提供密切的信息。
研究内容：
1.麦冬OjERF基因的克隆与定位。
(1)通过参考麦冬的转录组数据，设计特异性引物，PCR扩增麦冬OjERF基因的DNA序列。
(2)将PCR扩增得到的目标DNA序列进行克隆，测序，得到其全长序列。
(3)利用生物信息学工具，对麦冬OjERF基因进行分子结构预测和功能预测。
2.麦冬OjERF基因在逆境应答中的作用机制探究。
(1)构建麦冬OjERF基因的原核表达载体。
(2)将表达载体转化到大肠杆菌中，生产大量的麦冬OjERF蛋白。
(3)利用纯化技术，纯化出麦冬OjERF蛋白，用于进一步研究。
(4)利用麦冬原株和转基因植物，以及麦冬OjERF过表达株，进行抗逆性对比研究。
3.麦冬OjERF基因与其他基因间的相互作用关系研究。
(1)利用酵母双杂交技术，筛选出和麦冬OjERF基因互作的其它基因。
(2)利用高通量测序技术，对互作基因的表达谱进行分析，探究麦冬OjERF基因调节网络的组成和调节方式。
4.任务完成后撰写相关学术论文并进行报告。
研究成果：
1.成功克隆麦冬OjERF基因，并确定其基因组结构和表达方式。
2.预测并验证了麦冬OjERF基因在调控逆境应答中的作用机制。
3.发现和验证了麦冬OjERF基因与其他基因间的相互作用关系。
4.提供了麦冬遗传改良的有价值参考。
研究计划：
本次研究计划为期1年。
第1-2个月：设计特异性引物并扩增目标DNA序列，克隆目标DNA序列；
第3-4个月：生物信息学分析，预测麦冬OjERF基因的分子结构和功能；
第5-8个月：构建表达载体，转化大肠杆菌表达麦冬OjERF蛋白，纯化麦冬OjERF蛋白；
第9-10个月：进行抗逆性对比研究，探究麦冬OjERF基因调节网络的组成和调节方式；
第11-12个月：撰写相关学术论文并进行报告。
实验条件：
本研究所需的实验设备为PCR仪、电泳仪、镇波器、微量分析天平、纯化磨砂器等，实验所用的细菌为大肠杆菌，植物为麦冬。实验过程需在生物实验室内进行。
经费开支：
本次研究所需经费大约为10万元，其中包括实验材料费、设备费、劳务费等。经费来源为课题负责人所在单位。
进度安排：
根据上述研究计划，应在1年内完成研究工作，并撰写相关论文报告。如期完成研究工作，推动此研究在该领域获得更高水平成果。
参考文献：
1.刘秀林.麦冬ERF转录因子OjERF2c基因的功能研究[D].吉林大学植物科学研究所,2016.
2.BaiY,etal.ERF109ofTaiTaimeristemregulatesdaylength-dependentfloweringandshadeavoidancepathwayinArabidopsis.Naturecommunications,2019,10(1):1-13.