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根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因技术研究的任务书 任务书 一、任务背景 盾叶薯蓣(DioscoreazingiberensisC.H.Wright)是一种亚热带经济作物,因其含有丰富的淀粉、蛋白质和医药成分,在医学、食品工业和保健品等领域有着广泛的用途。但是,盾叶薯蓣的产量和品质受到许多病害和虫害的威胁,其中最为严重的是根癌病。目前,对于根癌病,传统的防治方法主要是化学药剂和手工清除根癌部位,但这些方式存在很多问题,例如药剂的环境污染和残留,手工操作的高强度和低效率等。因此,研究根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因技术,将具有重要的应用价值和意义。 二、任务目标 1.构建根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因系统。 2.分离并克隆盾叶薯蓣响应根癌农杆菌诱导的基因。 3.构建根癌农杆菌介导的抗根癌盾叶薯蓣转基因系统,获得抗根癌盾叶薯蓣品系。 三、研究内容和方案 1.构建根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因系统 (1)构建根癌农杆菌感染盾叶薯蓣的体系。 (2)从盾叶薯蓣中筛选合适的检测方法,建立盾叶薯蓣基因转化系统。 2.分离并克隆盾叶薯蓣响应根癌农杆菌诱导的基因 (1)收集盾叶薯蓣在感染根癌农杆菌后的样本,分离和纯化RNA。 (2)进行cDNA合成并进行扩增,获得与抗病相关的基因。 (3)进行克隆和测序,为后续的功能鉴定和转基因改良奠定基础。 3.构建根癌农杆菌介导的抗根癌盾叶薯蓣转基因系统,获得抗根癌盾叶薯蓣品系 (1)将克隆的抗病基因(如转录因子、水杨酸合成相关基因等)亚克隆到适合的载体上。 (2)将重组质粒导入盾叶薯蓣愈伤组织,通过遗传转化获得转基因盾叶薯蓣。 (3)通过多代选育获得抗根癌盾叶薯蓣品系。 四、研究进度 1.构建根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因系统(6个月) 2.分离并克隆盾叶薯蓣响应根癌农杆菌诱导的基因(9个月) 3.构建根癌农杆菌介导的抗根癌盾叶薯蓣转基因系统,获得抗根癌盾叶薯蓣品系(24个月) 五、研究过程中需要解决的问题 1.构建盾叶薯蓣转基因系统时的选择载体、基因启动子和转染方法。 2.根癌农杆菌感染盾叶薯蓣的体系的优化,使得感染效率高且不会损害盾叶薯蓣的生长和发育。 3.高效筛选抗根癌盾叶薯蓣品系的方法,达到对根癌病的抵抗能力最大化。 六、预期成果 1.建立根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转基因系统。 2.克隆并鉴定盾叶薯蓣响应根癌农杆菌诱导的抗病基因。 3.获得抗根癌盾叶薯蓣品系,为盾叶薯蓣的产量和品质提供保障。 七、参考文献 1.林泽琼,杨绍荣,曹琳.盾叶薯蓣农艺性状研究进展[J].广西植物,2010(3):339-345. 2.李克亚,罗江丽.盾叶薯蓣病害及其防治[J].广西农业科学,2017,48(2):212-214. 3.许婷婷,江小辉.盾叶薯蓣脱毒技术研究进展[J].科技创业月刊,2019,(08):48-49.