农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究的任务书.docx

农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究的任务书
任务书
项目名称：农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究
一、项目背景
油菜、大豆、棉花等油料作物生产现状日趋严峻，而亚麻油作为一种富含多不饱和脂肪酸的特殊油脂，其利用价值日益凸显。然而，亚麻油中含有少量的花生四烯酸（LA，18:2n6）和α-亚麻酸（ALA，18:3n3），而且缺乏ω-3多不饱和脂肪酸（PUFA）。因此，如何提高亚麻油中ω-3系列PUFA含量是当前亚麻油生产需要着重解决的问题。
△6-脂肪酸脱氢酶作为ω-3和ω-6PUFA生物合成途径上的关键酶之一，对ω-3和ω-6PUFA的合成有重要的影响。目前，已经有研究利用基因工程手段将△6-脂肪酸脱氢酶基因引入油菜、花生等油料作物中并获得了成功的实验结果。但是，对于亚麻，由于其质量较高的脂肪酸组分，其基因转化技术仍在研究探索阶段。
因此，本项目拟利用农杆菌介导的基因转化技术，将月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化到亚麻中，以期达到提高亚麻油中ω-3PUFA含量的目的。
二、研究目标
本项目的主要研究目标如下：
1.构建含有月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的转化载体。
2.利用农杆菌介导的基因转化技术将月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因成功转化到亚麻中，并获取转化植株。
3.对亚麻中转化△6-脂肪酸脱氢酶基因有关的生理、生化和遗传变化进行分析。
4.对转化植株的ω-3/ω-6PUFA含量进行测定，比较转化植株和野生型亚麻的PUFA含量，并初步探讨有关研究道路。
三、研究内容
本项目拟分为以下研究内容：
1.构建含有月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的转化载体。
2.将转化载体导入到农杆菌中，进行农杆菌的培养和质粒的提取。
3.采用叶盘法将转化质粒导入到亚麻叶片中。
4.筛选获得成功转化的亚麻植株，并进行初步的形态生理检测。
5.对转化植株的△6-脂肪酸脱氢酶基因和相应蛋白的表达进行分析。
6.分析转化植株与野生型亚麻在脂肪酸组分上的差异及ω-3/ω-6的比值。
四、进度安排及预计完成时间
本项目的预计完成时间为1年。
具体任务如下：
第1-2月：构建含有月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的转化载体，并进行酶切检测和序列验证。
第3-4月：将转化载体导入到农杆菌中，进行农杆菌的培养和质粒提取。
第5-6月：采用叶盘法将转化质粒导入到亚麻叶片中，并进行初步的形态生理检测。
第7-8月：筛选获得成功转化的亚麻植株，并进行基因表达分析。
第9-10月：对转化植株的脂肪酸组分和ω-3/ω-6的比值进行分析。
第11-12月：撰写研究报告并进行学术交流。
五、经费预算
本项目预计所需经费为30万元，主要包括试剂费、仪器维护费、人员津贴等。其中，试剂费占35%、仪器维护费占25%、人员津贴占40%。
六、研究团队及进度监控
本项目研究团队由2名博士、2名硕士和1名本科生组成。项目负责人负责项目的总体规划和进度监控。
七、预期成果
1.月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因在亚麻中成功转化，并获得转化植株。
2.分析了亚麻中转化△6-脂肪酸脱氢酶基因有关的生理、生化和遗传变化。
3.对转化植株的ω-3/ω-6PUFA含量进行了测定，并初步探讨研究道路。
4.发表相关研究论文1篇以上。