家蚕钙磷蛋白(BmCAPS)的原核表达及定位分析的任务书.docx

家蚕钙磷蛋白(BmCAPS)的原核表达及定位分析的任务书
任务书
一、任务背景
家蚕是世界上重要的经济昆虫之一，其与蚕丝的生产关系密切，因此在家蚕的研究中发掘潜在的生产性状基因成为了研究的热点之一。家蚕钙磷蛋白（BmCAPS）在家蚕生长发育中起着重要的作用。研究表明，BmCAPS在家蚕的脱水应激中调节了Ca2+信号途径，提高了家蚕对脱水应激的耐受性（Juetal.,2015）。此外，BmCAPS还能够参与家蚕的掌握、学习、记忆等高等神经活动的过程（Geetal.,2017）。因此，研究BmCAPS在家蚕中的表达及定位对于进一步认识其功能及调控机制具有重要意义。
二、任务内容
1.BmCAPS全长基因的克隆及序列分析，包括ORF、氨基酸序列推导、同源性分析等。
2.构建表达蛋白（包括GST、His、MBP等标签）的原核表达载体，并进行条件优化和较优表达条件的筛选，包括温度、IPTG浓度、诱导时间等。
3.蛋白的原核表达及纯化，包括菌群的分裂、细胞裂解、蛋白质的亲和层析纯化等步骤，并进行各个步骤的效果评估。
4.西方印迹法验证BmCAPS蛋白的表达情况。
5.利用原核表达及全反式荧光显微镜技术，分别进行单一蛋白及双荧光染色体共定位实验，并通过分别用贡献比较显微相机和红外防抖相机拍摄原位定位的图像进行结构学对比分析。
三、任务要求
1.基础要求：具备基本的生物学实验操作技能和分子生物学知识，熟悉原核表达、纯化及蛋白质免疫印迹技术。
2.设计方案：具备高质量实验设计能力，能够根据研究问题提出可行性方案，并分析方案的可行性和实施难度，充分考虑安全风险并制定相应的安全保障措施。
3.数据分析：具备科学数据处理能力，进行实验结果的分析和解读，并编写实验报告。同时，要关注科学伦理，确保数据的真实性和客观性。
4.团队合作：能够积极协作，与其他实验人员共同完成实验任务，在团队协作中发挥自己的专业优势。
四、参考文献
JuX,etal.IdentificationandfunctionalanalysisofanovelgeneBmCAPSencodingacalcium-bindingandprotein-likesignalsmodulatingcalciumtransportingATPaseforcuticleintegrityinBombyxmori.BiochemBiophysResCommun.2015;465(3):462-466.
GeB,etal.Acalcium-bindingprotein,BmCAP,regulatesbehavioralhabituationinvitrointhesilkwormBombyxmori.Naturwissenschaften.2017;104(3-4):14.
任课老师：XXXXX
指导教师：XXXXX
起止时间：XXXXX
任务地点：XXXXX
任务执行人：XXXXX
任务排期：
（1）第1周：文献查阅及实验计划制定。
（2）第2-3周：基因克隆及序列分析。
（3）第4-5周：载体构建及表达条件优化。
（4）第6-8周：蛋白的原核表达及纯化，西方印迹实验。
（5）第9-11周：单一蛋白及双荧光染色体共定位实验及图像处理。
（6）第12周：数据分析和实验报告撰写。