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去细胞人羊膜负载骨髓基质干细胞联合基质修复大鼠脊髓横断性损伤的研究的任务书 任务书 一、研究背景 脊髓横断性损伤(SCI)是一种严重的神经系统损伤,其病理生理的变化会导致患者的运动、感觉和自主调节失调。SCI的治疗一直是医学领域的研究热点之一。干细胞治疗作为一种新兴的治疗方法,已经受到了众多学者的关注。而基质细胞则是干细胞治疗领域中常用的一种细胞类型。 前期研究表明,人羊膜具有丰富的基质细胞来源,可以通过跨过性类胚层连接膜转化为干细胞。人羊膜细胞不仅具有多向分化潜能,而且具有一定的免疫调节作用,可以促进损伤组织的再生和修复。骨髓基质干细胞具有高度自我更新和分化的能力,可以分化为神经元、胶质细胞和骨髓基质细胞等。因此,通过将这两种基质细胞结合起来,可以促进神经系统的再生和修复,从而有效治疗SCI。 本研究旨在探究去细胞人羊膜与骨髓基质干细胞联合基质的治疗作用及其治疗机制,为临床SCI治疗提供一种新的治疗方法。 二、研究目的 本研究旨在探讨去细胞人羊膜负载骨髓基质干细胞联合基质在大鼠SCI治疗中的应用价值及其作用机制,主要研究内容包括: 1.建立SCI大鼠模型以及治疗组(去细胞人羊膜负载骨髓基质干细胞联合基质注射)和对照组(生理盐水注射); 2.通过行为学测试(如BBB评分等)和电生理检测等方法,评估治疗组和对照组的运动和神经功能的恢复情况; 3.采用组织学和分子生物学等方法,研究治疗组和对照组SCI患者组织的炎症反应、基质沉积、神经元和胶质细胞再生和修复等方面的变化。 三、研究方法 1.动物模型建立 选用健康雄性Wistar大鼠,体重250-300g,行T8脊髓横断性损伤手术,创造SCI模型,术后自由活动三天后开始治疗。 2.细胞处理和治疗方法 将去细胞人羊膜和骨髓基质干细胞混合,通过基质增生因子诱导培养,制备出联合基质。治疗组行腹腔注射联合基质,对照组行腹腔注射生理盐水。 3.定量评估神经系统功能恢复情况 行为学测试:在治疗前、治疗后1、2、4、8周时,使用BBB评分法、足趾展开电位法和背根电位法等进行观察和评价。 电生理检测:在治疗前和治疗后2、4、8周时,采集神经节电位和运动电位,观察神经元和胶质细胞的再生和修复。 4.分子生物学方法评估组织学变化 在治疗前、治疗后2、4、8周时,研究SCI患者组织的炎症反应、基质沉积、神经元和胶质细胞再生和修复等方面的变化。采用RT-PCR、Westernblot、免疫组织化学staining等方法检测这些机制。 四、研究意义和预期结果 本研究通过建立SCI大鼠模型,研究去细胞人羊膜负载骨髓基质干细胞联合基质在SCI治疗中的作用,可以得出以下预期结果: 1.去细胞人羊膜负载骨髓基质干细胞联合基质治疗SCI大鼠可以促进神经系统的再生和修复,显著改善大鼠的运动和神经功能。 2.去细胞人羊膜和骨髓基质干细胞联合基质能够减轻SCI大鼠的炎症反应,降低局部组织的损伤,促进胶质细胞的再生和修复。 3.本研究探讨的治疗机制可以为临床尝试及推广新的治疗策略提供理论基础和相关参考。 五、参考文献 LiY,etal.Umbilicalcord-derivedmesenchymalstemcellsconferpotentneuroprotectioninischemicmice[J].Frontiersinagingneuroscience,2017,9:159. RodriguesMC,etal.Humanumbilicalcordtissue-derivedmesenchymalstromalcellsattenuatespinalcordinjurybyimmunomodulationthroughgalectin-1andsolubleCD14[J].Journalofcellularandmolecularmedicine,2019,23(3):1874-1887. DingDC,ShyuWC,LinSZ.Mesenchymalstemcells[J].Celltransplantation,2011,20(1):5-14. GoldshmitY,etal.AxonalregenerationandlackofastrocyticgliosisinEphA4-deficientmice[J].JournalofNeuroscience,2004,24(45):10064-10073.