3个基因座复合扩增体系的构建及其法医学应用研究的任务书.docx

3个基因座复合扩增体系的构建及其法医学应用研究的任务书
任务书
题目：3个基因座复合扩增体系的构建及其法医学应用研究
背景与意义：
DNA分析是现代法医学鉴定中最重要的技术之一，而基因座是DNA分析的基础单元。复合扩增技术是一种高效的DNA分子生物学技术，可以同时扩增多个基因座，大大提高了DNA检测的效率。当今社会，犯罪案件频繁发生，在法医学鉴定中对嫌疑人的DNA检测尤为重要，而复合扩增技术的应用可以提高检测效率，并加强对罪犯的定罪的科学性和可靠性。因此，本项目旨在构建3个基因座复合扩增体系，以应用于法医学鉴定。
任务目标：
1.构建3个基因座复合扩增体系。本项目构建的多基因座复合扩增体系，需要考虑扩增不同基因座的适配性和特异性，避免受到PCR所需温度和化学参数的影响。
2.研究复合扩增体系的扩增效率、特异性和稳定性。需要对构建的3个基因座复合扩增体系进行反应条件优化和PCR扩增效率、特异性及稳定性的研究，以提高其扩增效率、特异性和稳定性。
3.应用复合扩增体系于法医学鉴定中的实验验证。本项目除了构建和研究复合扩增体系外，还需要应用复合扩增技术于体外试验中，通过DNA对比鉴定等手段，验证其准确性和可靠性。
技术路线：
1.筛选三个适合的基因座。本项目将从已有的FBI的CODIS数据库中筛选出3个核心和多样性良好的基因座。
2.设计引物体系和试剂反应体系。根据所筛选出基因座的序列特征，设计并合成合适的引物，进行PCR扩增。在选择和优化试剂反应体系时，我们需要考虑反应体系的pH值、离子浓度、核酸模板的质量和含量等一系列参数，来获得最佳的反应体系。
3.对复合扩增反应条件进行优化。根据反应体系和引物特点，我们将基于所构建的复合扩增反应体系，通过改变温度、时间、引物浓度、模板DNA质量等多重条件，进行反应条件优化。
4.构建复合扩增系统并验证其特异性，稳定性和扩增效率。将所构建的复合扩增系统进行相应反应条件下的扩增实验，并用扩增酶检测其特异性、稳定性和扩增效率等指标。
5.应用复合扩增技术于体外试验中。以DNA的分离、纯化和扩增为基础，通过PCR检测和测序等技术，验证所构建三个基因座的复合扩增体系的准确性和可靠性。
关键技术及实验设计：
1.DNA提取和纯化技术。从样本中提取DNA，并采用一系列纯化技术进行DNA纯化，获得高质量的DNA样品。
2.引物的设计和合成。通过已有的基因序列信息，根据引物设计的原则构造合适的引物，进行引物的合成。
3.PCR技术。在优化反应条件的基础上，进行多基因座复合扩增反应，以最优性的条件下得到高效、特异性良好的复合扩增产物。
4.电泳技术以及PCR产物聚合酶探测。DNA扩增以后，通过电泳技术检测扩增产物的长度和数量，同时采用特异性弱化线性聚合酶探测技术识别复合扩增产物。
参考文献：
1.王忠.变性酸浸提与硅藻土管柱制备基因组DNA共栖灰蝶.分子生物学报.2013,49(1):93-98.
2.高翔，林坤威.一种基于多点突变扩增的多基因位检测技术.中国科技论文在线.2015,12(7):837-842.
3.RopiquetA,Gerbault-SeureauM,FéronC,etal.Poweroffivetetramericmicrosatellitelociforparentage,kinshipandpopulationanalysesinCaprahircus.AnimalGenetics,2015,46(5):541-542.