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盾壳霉胞外蛋白酶特性、分离纯化及其生防作用评估的任务书 任务书 论文题目:盾壳霉胞外蛋白酶特性、分离纯化及其生防作用评估 任务背景: 盾壳霉是一种广泛存在于自然界中的真菌,具有较强的生物防御能力。其产生的许多代谢产物如次生代谢产物和胞外酶等被广泛应用于农业生产、食品工业和医药保健等领域。其中盾壳霉胞外蛋白酶是生物防治中的重要酶类之一,可以降解害虫的外壳和肠道上皮细胞,进而导致害虫死亡。由于其具有高效、绿色、安全等特点,因此受到了广泛关注。 任务目的: 1.探究盾壳霉胞外蛋白酶的产生规律和生化特性,建立分离纯化方法; 2.评估盾壳霉胞外蛋白酶在生物防治中的作用,研究其应用前景。 任务内容及步骤: 1.盾壳霉胞外蛋白酶的产生规律和生化特性研究 (1)建立盾壳霉胞外蛋白酶的产生规律研究模型,按照不同培养条件(温度、pH值、培养时间等)对其产酶量进行筛选,并利用酶学方法对其酶活性进行测定。 (2)利用SDS-PAGE等方法对分离纯化后的盾壳霉胞外蛋白酶进行电泳分离和鉴定,考察蛋白酶降解分子量、等电点、亲和力等特性。 2.盾壳霉胞外蛋白酶的分离纯化方法建立 (1)优选盾壳霉胞外蛋白酶分离纯化的最佳工艺流程。比较常规分离纯化方法的优缺点,根据盾壳霉胞外蛋白酶的特性设计分离纯化方案。 (2)采用宏观分离法和微生物培养技术结合,建立盾壳霉胞外蛋白酶分离纯化方法,并对得到的酶活进行测定和对比。 3.盾壳霉胞外蛋白酶在生物防治中的应用研究 (1)测试盾壳霉胞外蛋白酶对害虫的防治效果。在实验室条件中,将盾壳霉胞外蛋白酶与干饲料混拌,喂养白粉虱,观察其死亡率等指标。 (2)评估盾壳霉胞外蛋白酶与其他生物农药的协同作用,考察其防治效果的提高。 任务成果: 1.盾壳霉胞外蛋白酶产生规律和生化特性的研究报告 2.盾壳霉胞外蛋白酶分离纯化方法的建立与优化报告 3.盾壳霉胞外蛋白酶生物防治应用评估报告 任务评估指标: 1.任务完成的深度和广度; 2.任务完成的时间节点; 3.论文的撰写水平和创新性; 4.任务成果的实用性和推广应用价值。 参考文献: 1.张建国,胡浩,李萍萍,杨晓林.盾壳霉胞外蛋白酶的产生规律及应用研究[J].山东农业科学,2018,50(11):73-76. 2.罗肖,陈佩蓉,陈志芳,王滨,马楼贵.盾壳霉胞外蛋白酶的优化分离纯化工艺研究[J].果树学报,2018,35(5):1306-1312. 3.陈春丽,陈小军,林敬堂.盾壳霉胞外蛋白酶应用现状与前景[J].中国生物防治学报,2019,35(2):145-150.