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不同炮制工艺对水蛭药效成分含量的影响[摘要]目的:研究不同炮制工艺对水蛭药材水浸出物含量、醇浸出物含量、微量元素含量及氨基酸含量的影响为确定最有效的加工方法提供理论依据。方法:分别用开水烫烘、酒浸闷烘、酒火炙3种方法对水蛭进行加工测定其水浸出物含量、醇浸出物含量、微量元素含量及氨基酸含量等指标依据上述指标对3种加工方法进行综合评价。结果:水浸出物含量开水烫烘与酒火炙无显著性差异(P>0.05)酒浸闷烘优于开水烫烘与酒火炙(P[关键词]炮制;水蛭;药效成分;研究[中图分类号]R283[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2008)02(b)-031-02水蛭为水蛭科动物水蛭Hirudonipponicawhitman的干燥全体具有破血、逐瘀、通络的作用主要含有蛋白质、氨基酸、抗凝血酶、水蛭素及一些人体必需微量元素[1]。目前水蛭的炮制方法有很多但以何种方法炮制才能使其药效成分得到更好的应用目前研究报道尚不多见。为此笔者对水蛭的炮制工艺(开水烫烘、酒浸闷烘、酒火炙3种方法)进行了对比研究对各自的醇溶性浸出物、水溶性浸出物、微量元素、氨基酸含量进行比较确定了最有效加工方法现报道如下:1材料与方法1.1材料新鲜水蛭由专人捕捉(湖南岳阳市郊水田中)经鉴定为水蛭Hirudonipponicawhitman。1.2主要仪器RX3Q系列箱式电阻炉;GZX-DR型电热恒温干燥箱;电热恒温水浴锅;氨基酸自动分析仪;等离子质谱仪。1.3加工方法1.3.1开水烫烘将纯净水煮沸随机取水蛭50只称重置于沸水中30min取出将水沥干然后置40℃烘箱中干燥取出研末备用。1.3.2酒浸闷烘随机取水蛭50只称重加黄酒(1kg水蛭用黄酒100g)拌匀闷透用文火炒至酒吸尽取出放入40℃烘箱中干燥至微变色质酥脆时取出研末备用。1.3.3酒火炙随机取水蛭50只称重根据文献[2]用10%酒精(1kg水蛭用酒精100g)拌匀点燃酒精不断翻动待火熄灭后水蛭段微鼓起表面变黄棕色部分呈焦斑取出研末备用。1.4各项指标测定1.4.1浸出物含量测定水浸出物含量按2000年版《中国药典》[3]一部(附录ⅨH)水分测定法(烘干法)测定。醇浸出物含量测定:取样品约3g精密测定置250ml锥形瓶中准确加入50%乙醇100ml塞紧称定重量静置2h后置水浴中加热回流lh放冷后取下锥形瓶称定重量用50%乙醇补足减失的重量摇匀用干燥滤器滤过。准确量取滤液50ml置已干燥至恒重的蒸发皿中。在水浴上蒸干后于105℃干燥3h移置干燥器中冷却30min准确称定重量以干燥品计算样品中醇溶性浸出物的百分含量。1.4.2微量元素含量测定使用等离子质谱仪测定。1.4.3氨基酸测定精密称取样品按氨基酸水解法制备使用氨基酸自动分析仪测定。1.5统计学方法所有数据用x±s表示各指标组间比较采用成组资料均数比较的方差分析P2结果2.1不同炮制方法对水蛭浸出物的影响见表1。2.2不同炮制方法对元素含量的影响见表2。2.3不同炮制方法对氨基酸含量的影响见表3。3讨论水蛭为动物类药主要成分为蛋白质并含有多种氨基酸、抗凝血酶、水蛭素及一些人体必需微量元素。水蛭的炮制方法现今有清炒、砂炒、滑石粉炒、开水烫烘等方法高温炒、烫的炮制工艺容易引起药材中蛋白质类活性成分的降解与变性。有人[4]曾对生、酒制、烫水蛭中的蛋白质作了比较发现酒制易于水蛭中蛋白质浸出烫水蛭中蛋白质则因变性而不易浸出。用黄酒炮制水蛭有以下优点:①矫味矫臭作用。黄酒制后水蛭的腥气减弱易于被病人接受。②增强活血通络作用。黄酒性温具有活血作用可增强其破血、逐瘀、通络之功效。③引药上行。酒制之后进行低温烘干能很好地保存水蛭的药效成分。研究发现酒浸闷烘的水浸出物、醇浸出物优于开水烫烘及酒火炙说明开水烫烘及酒火炙因高温使得水蛭蛋白质变性且不利于有效成分的溶出。虽然3种方法所得的氨基酸种类无显著性差异但是在氨基酸的含量上酒浸闷烘明显优于开水烫烘及酒火炙。研究表明宏量元素Ca、Mg能抑制其他微量元素的吸收[5]本文研究还发现酒浸闷烘的水蛭微量元素的含量明显高于其他两种方法而宏量元素Ca、Mg明显低于开水烫烘这对提高水蛭微量元素的吸收有一定的价值说明酒浸闷烘炮制对提高水蛭药材的临床疗效具有一定作用。水蛭经酒制后其毒性微量元素Pb的含量明显降低提示水蛭酒制后可能使其毒性降低减少了水蛭的毒性反应提