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WesternBlot的原理SDS-PAGE原理Westernblot内容步骤2,电泳 向电解槽中加入适量的RunningBuffer,将蛋白样品以50ug的标准换算出的体积进行上样。以电压120V或160V进行电泳,电泳至前沿跑至最底端即可进行转膜。 转膜 用硝酸纤维素膜(NC膜),进行转膜。组装转膜“三明治”的过程在Transferbuffer中进行:黑的一面在下,依次放上滤纸、凝胶、NC膜、滤纸,然后合上三明治。整个过程必须保证无气泡。接着把转膜“三明治”放入转膜槽中,注意正负极放置正确。倒入适量的Transferbuffer。在冰浴中进行转膜。转膜条件:120V,1.5h或者150V,1h 封闭 转膜结束后,取出NC膜,按照所需蛋白的位置,裁剪NC膜。使其浸润于封闭液中,缓慢摇荡1h