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基因枪法介导幼胚转NAC-43基因小麦的获得及插入位点的初步研究的中期报告 中期报告:基因枪法介导幼胚转NAC-43基因小麦的获得及插入位点的初步研究 序言: 小麦是全球重要的粮食作物之一,对于其品质和产量的提高一直是研究人员的热点。在植物生长发育的过程中,NAC基因家族在胁迫蛋白的调节和信号转导中发挥了至关重要的作用。因此,本研究选择了NAC-43基因将其导入小麦中,以探究其作用以及插入位点。 方法: 1、将NAC-43基因和大麦氧合酶(Iox1)的DNA序列分别插入到载体pUC19和pBI121中; 2、用高效基因枪法将pUC19-NAC-43和pBI121-Iox1质粒DNA导入小麦DH-149幼胚中,筛选出阳性转化植株; 3、PCR和Southernblot方法鉴定阳性转化植株的插入位点。 结果: 1、通过PCR筛选出了15个阳性转化植株; 2、通过Southernblot鉴定,发现其中11个植株具有单一插入的转基因; 3、通过PCR-Southernblot双重检测,得到了8个单一插入的转基因,分别为T1至T8。 结论: 本研究成功将NAC-43基因导入小麦中,并得到了8个单一插入的转基因。进一步研究可以探究NAC-43基因在小麦生长发育中的调节和信号转导机制。