一例混合感染奶牛乳房炎病例病原菌分离鉴定及药敏试验.pdf

疾病防治
DiseasePrevention
一例混合感染奶牛乳房炎病例病原菌
分离鉴定及药敏试验

曹芳1，魏勇2，吴忧1，王晨豫1，赵鹏飞1，李智星2，任静静1，齐亚银1

1石河子大学动物科技学院，新疆石河子832003
2新疆天润科技股份有限公司，新疆乌鲁木齐830063

摘要：[目的]新疆某规模化牧场奶牛乳房炎较严重，治疗许久未愈。探究致病原因，找到合理应对措施。
[方法]本试验采集典型奶牛乳房炎病料，对其进行分离鉴定及药敏试验。[结果]病原菌分离纯化结果表明，
该牧场奶牛乳房炎主要为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、梭菌等多种细菌混合感染所致。药敏试验结果表明，
大肠杆菌对复方新诺明、卡那霉素、恩诺沙星、环丙沙星高度敏感，其中环丙沙星极敏感；金黄色葡萄球菌
对复方新诺明、卡那霉素、恩诺沙星、氯霉素极度敏感；梭菌对氯霉素、头孢曲松、氨苄西林高度敏感。
[结论]本研究对乳房炎奶样分离，得到了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及梭菌，建议该牧场对患病牛采取隔离
措施，并使用替米考星、头孢噻呋钠及梭菌疫苗进行联合用药治疗。
关键词：奶牛乳房炎；病原菌；分离；药敏试验

文章编号：1671-4393（2024）01-0056-05DOI:10.12377/1671-4393.24.01.11

临床症状，将奶牛乳房炎分为临床型乳房炎和隐

0引言性乳房炎[1]。研究发现，已有超过180种病原菌会引

起奶牛乳房炎[2，3]。奶牛乳房炎主要是由于链球菌、
乳房炎是奶牛最重要且常见的疾病之一，会导金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和支原体所致，此外，
致奶牛产奶量和牛奶品质下降，亦可导致机体免环境性链球菌、肠球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌等也

疫力下降。奶牛乳房炎主要症状为乳房实质、间可引起乳房炎[4，5]。
质的炎症，表现为红、肿、热、痛等。根据有无目前，抗生素治疗乳房炎仍是最常见的手段，

基金项目：奶牛信息智能化管理技术研究与示范（编号：NYHXGG，2023AA310）；石河子大学高层次人才科研启动项目
（编号：RCZK202042）
作者简介：曹芳（1996-），女，山东邹平人，硕士，研究方向为预防兽医学；
魏勇（1980-），男，四川资中人，硕士，高级兽医师，研究方向为奶牛健康养殖；
吴忧（1999-），女，河南平顶山人，硕士，研究方向为预防兽医学；
王晨豫（1996-），男，宁夏石嘴山人，硕士，研究方向为动物疾病诊断及防控技术；
赵鹏飞（2001-），男，河南安阳人，硕士，研究方向为预防兽医学；
李智星（1998-），男，新疆五家渠人，硕士，研究方向为奶牛养殖；
任静静（1990-），女，河南长垣人，讲师，博士，研究方向为动物细菌性疾病诊断与防治；
齐亚银（1980-），男，宁夏固原人，教授，博士，研究方向为预防兽医学。

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2024/1NO.265中国乳业
DiseasePrevention疾病防治

但广泛长期使用致使很多病原菌产生耐药性，有的管中，4℃保存备用。
甚至出现多重耐药现象，不但对奶牛造成不可挽回
1.5病原菌分离纯化
的伤害，并且严重危及养殖业发展。
近年来，随着新疆奶牛养殖业发展，乳房炎发将奶样无菌接种于BHI液体培养基，置于37℃
病率逐年升高，规模化牧场奶牛乳房炎发病情况更摇床过夜培养。涂片固定后进行革兰氏染色，在显
突出，因此，针对典型临床型奶牛乳房炎病例无菌微镜下观察，初步确定相关病原菌。
采集奶样，进行实验室分离鉴定及药敏试验，为该将观察到的相关菌液分别无菌划线接种于伊红
牧场的奶牛乳房炎防治提供参考。美蓝琼脂培养基、ss琼脂培养基、甘露醇盐琼脂培养
基、梭菌鉴别琼脂培养基，置37℃恒温培养箱中培
1材料与方法养24～48h。挑取各鉴别平板上的典型单菌落接种于
BHI液体培养基、厌氧培养基，置于37℃摇床过夜
1.1病例来源及试验地点
培养。分别将划线接种于麦康凯琼脂培养基、Baird-
本研究样品于2023年7月份取自新疆某规模化Parker琼脂培养基、梭菌鉴别琼脂培养基，37℃培养
牧场典型患乳房炎奶牛奶样，临床诊断均在牧场进24～48h。继续挑取典型单菌落接种于BHI液体培养
行，后期的实验室检测于石河子大学动物科技学院基（梭菌鉴别平板上的菌落接种于厌氧培养基），
反刍动物重要疫病防控研究室进行。置于37℃全自动震荡培养箱中过夜培养，分别镜
检，观察。
1.2试验仪器设备
1.6PCR鉴定
光学显微镜（光学显微镜）、恒温培养箱（北
京市永光明医疗仪器厂）、电泳仪（北京市六一仪按照细菌基因组DNA提取试剂盒说明书步骤，
器厂）、PCR扩增仪（Techne公司）、凝胶成像系提取细菌总DNA，-80℃储存备用。根据大肠杆

统（Biorad公司）。菌、金黄色葡萄球菌、梭菌[7]特异性引物进行PCR
扩