水中细菌总数测定.ppt

水中的细菌总数测定（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验器材
（四）实验方法
（五）实验作业（一）实验目的（二）实验原理常用加热灭菌法：
1、干热灭菌：
用火焰烧灼或电热干燥箱内高温热空气灭菌
2、湿热灭菌
⑴高压蒸汽灭菌法
⑵间歇灭菌法
⑶煮沸消毒法（三）实验器材1.称量按照培养基配方，准确称量各成份放于瓷缸中。
配方：牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g，NaCl5.0g,琼脂20.0g,蒸馏水1000ml,pH7.0。2.溶解
向上述瓷缸中加入所需要的水量，搅拌，加热使其溶解。如是配制固体培养基，在琼脂的熔化过程中，需不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待完全熔化后，补足所失水分。
3.调节pH值
用玻璃棒沾少许液体，测量PH值。用氢氧化钠和盐酸调节PH。4.过滤用滤纸或多层纱布过滤，一般无特殊要求可省去。
5.分装及包扎
根据不同的需要，可将制好的培养基分装入试管内（用分装漏斗）或三角瓶内，管（瓶）口塞上棉塞。最后用牛皮纸将棉塞部分包好。6.灭菌：高压蒸汽灭菌，1210C灭菌20分钟。
7.灭菌后试管摆放斜面1213注意事项（五）实验作业消毒与灭菌（二）高压蒸汽灭菌
1、原理
利用加热一个密闭的加压灭菌锅，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
一般培养基用0.1Mpa，121.5℃,15～30min
2、步骤
（三）紫外线灭菌法
1、原理
紫外线杀菌机理主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制了DNA的复制。另一方面，由于辐射能使空气中的氧电离成[O]，再使O2氧化生成臭氧或使水氧化生成H2O2。O3和H2O2均有杀菌作用。
适用于无菌室，接种箱，手术室内的空气及物体表面的灭菌。
2、步骤
1）单用紫外灯
在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关，照射30min，将开关关闭。
2）化学消毒剂与紫外线照射结合使用
在无菌室内，先喷洒化学消毒剂溶液，再用紫外线灯照射15imn
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