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化合物T20对P-gp介导的K562ADM细胞阿霉素耐药性的逆转作用的开题报告 1.研究背景 化疗药物阿霉素(Adriamycin,ADM)是一种广泛应用于临床治疗肿瘤的化疗药物,但其治疗效果受到多种因素的制约,其中最重要的是细胞膜上的P-glycoprotein(P-gp)介导的多药耐药(MDR)。P-gp是一种ATP酶转运泵,在细胞膜上能够识别和转运多种化学药物,导致化疗药物在细胞内积累不足,从而失去药物敏感性。 因此,寻找能够逆转P-gp介导的MDR的化合物,对于提高化疗药物的治疗效果具有重要的意义。其中,化合物T20是一种自然产物,具有一定的抗肿瘤活性,并且被发现具有逆转P-gp介导的MDR的作用。但其具体作用机制还不清楚。 本研究旨在探究化合物T20对P-gp介导的K562ADM细胞阿霉素耐药性的逆转作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。 2.研究方法 2.1实验材料 人慢性髓样白血病K562细胞和多药耐药K562ADM细胞,阿霉素(ADM),化合物T20。 2.2实验步骤 2.2.1细胞培养 将K562和K562ADM细胞分别培养于RPMI1640培养基中,加入10%FBS和1%Penicillin-Streptomycin,37℃下5%CO2培养。 2.2.2紫杉醇(Taxol)对比实验 将K562和K562ADM细胞分别分成对照组和实验组。对照组加入不同浓度的紫杉醇,实验组同样加入紫杉醇和不同浓度的化合物T20。细胞存活率通过MTT法测定,比较两组细胞对紫杉醇的敏感度。 2.2.3阿霉素逆转实验 将K562和K562ADM细胞分别分成对照组和实验组。对照组加入不同浓度的阿霉素,实验组同样加入阿霉素和不同浓度的化合物T20。细胞存活率通过MTT法测定,比较两组细胞对阿霉素的敏感度。 2.2.4Westernblot分析 收集K562和K562ADM细胞,利用Westernblot检测P-gp的表达量和化合物T20对P-gp的作用。 3.预期结果和意义 预计化合物T20能够逆转P-gp介导的K562ADM细胞对阿霉素的耐药性,且其逆转MDR的作用可能与P-gp的表达量有关。通过本实验的结果,将为进一步探究化合物T20的MDR逆转机制提供指导,为提高化疗药物的治疗效果提供理论依据。