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侧孢短芽孢杆菌侵染性蛋白酶的表达及其随机突变文库的构建的综述报告
侧孢短芽孢杆菌（Clostridiumdifficile）是一种严重的肠道疾病病原菌，其感染已成为全球公共卫生问题。侧孢短芽孢杆菌感染的主要原因是其分泌的定位在胞外的毒素（toxin）。其中，毒素A和毒素B是导致临床症状的主要毒素。
侵染性蛋白酶（invasiveprotease）是侧孢短芽孢杆菌毒素分泌途径的一个重要组分，它能促进毒素的定位和释放到胞外。因此，侵染性蛋白酶的研究对于了解侧孢短芽孢杆菌的病理机制具有重要意义。
目前，已经有研究人员对侵染性蛋白酶进行了表达和突变构建的研究。下面将对这些研究进行综述。
一、侵染性蛋白酶的表达研究
侵染性蛋白酶编码基因（cd2831）被克隆到表达载体中，然后在大肠杆菌中进行表达。表达产物被纯化，并进行了酶活性检测。实验结果表明，表达的蛋白能够在天然底物中断裂肽键，并具有对人源性蛋白的裂解活性。
另一项研究将侵染性蛋白酶的编码基因克隆到较小的表达载体pQE-30中。该表达载体在大肠杆菌中进行表达和纯化。结果表明，该构建的表达载体能够成功表达侵染性蛋白酶，并具有较高的酶活性。并利用该表达载体进行了酶动力学研究。
二、侵染性蛋白酶的随机突变文库的构建
在突变库的构建中，采用错误切割联合聚合酶链式反应的方法，随机将cd2831基因突变，然后将突变的基因克隆到表达载体pQE-30中。突变的蛋白酶进行了筛选，获得了一系列具有不同酶活性的突变体。
这些突变体被进一步用于筛选和酶动力学研究。结果表明，这些突变体分别具有不同的酶活性和底物特异性。
三、研究结论
通过以上研究可以得出以下结论：
1.在大肠杆菌中成功表达侵染性蛋白酶，并鉴定了其具有对人源性蛋白的裂解活性。
2.利用较小的表达载体成功表达侵染性蛋白酶，并开展了相关的酶动力学研究。
3.通过随机突变法构建出侵染性蛋白酶的突变文库，并成功筛选出一系列具有不同酶活性和底物特异性的突变体。
本文综述了侵染性蛋白酶表达和突变文库的构建研究，为了解侧孢短芽孢杆菌的病理机制提供了有价值的信息。但是在未来的研究中，仍需要对侵染性蛋白酶的功能机制、分子结构等方面进行深入研究，以期为侧孢短芽孢杆菌的治疗提供新的思路和方法。