鸡IL-17cDNA的克隆与表达及其单克隆抗体的制备的中期报告.docx

鸡IL-17cDNA的克隆与表达及其单克隆抗体的制备的中期报告
本次实验的目标是克隆鸡IL-17cDNA，利用重组蛋白表达技术表达蛋白并制备单克隆抗体。
实验设计：
1.设计引物，从鸡的淋巴组织中扩增IL-17基因的cDNA序列。
2.构建重组表达载体，将扩增的cDNA序列与载体连接。
3.将表达载体转化到大肠杆菌中，进行重组蛋白的表达。
4.纯化和鉴定所表达的重组蛋白。
5.用表达的重组蛋白免疫小鼠，获得单克隆抗体。
6.对获得的单克隆抗体进行鉴定和分析。
实验进展：
1.已经设计合成引物，并通过PCR技术从鸡淋巴组织中扩增出了鸡IL-17基因的cDNA序列。
2.已经将扩增得到的cDNA序列与表达载体连接，并通过质粒测序鉴定了正确的重组载体。
3.已经将表达载体转化到大肠杆菌中，并通过SDS-PAGE和Westernblot技术检测了表达出的重组蛋白。
4.已经对表达的重组蛋白进行了纯化和鉴定，确定了纯化条件。
5.目前正在用表达的重组蛋白免疫小鼠，以获得单克隆抗体。
预期结果：
完成本实验，将得到鉴定出正确基因的载体、表达出纯化得到的鸡IL-17重组蛋白、以及制备得到的单克隆抗体。这些实验结果将提供这些分子的进一步研究的实验基础。