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LEA基因改造和载体构建及旱稻遗传转化的中期报告 1.概述 本次实验旨在通过基因改造和载体构建,实现对旱稻遗传转化的控制,分析其遗传特性和生长状况,为旱稻的生长和发展提供帮助。 2.实验方法 2.1LEA基因改造 根据文献报道,在基因改造的实验中,我们选择LEA11基因作为转化目标基因。将该基因克隆进植物载体pCAMBIA2300,通过CaMV35S启动子的控制,成功构建含有LEA11基因的转化载体。 2.2转化载体构建 我们将上述构建好的载体通过冷冻电转法导入旱稻愈伤组织中,使用膜生长法将愈伤组织进行筛选和培养,筛选出转化成功的旱稻愈伤组织并进一步培养。 2.3遗传转化分析 对转化后的旱稻愈伤组织进行PCR扩增,分析LEA11基因是否成功整合进旱稻基因组。进一步,通过Western印迹分析和基因组测序,研究LEA11基因在旱稻中的表达情况及其对生长发育的影响。 3.实验结果 经过实验,我们成功构建了含有LEA11基因的转化载体,通过冷冻电转法导入旱稻愈伤组织,筛选出了转化成功的旱稻愈伤组织,并通过PCR扩增和基因组测序分析,证实LEA11基因已经成功整合到旱稻基因组中。进一步对转化后的旱稻愈伤组织进行分析,证明LEA11基因在旱稻中表达并且对旱稻的生长发育起到了一定的促进作用。 4.结论 本次实验通过LEA基因改造和载体构建,成功实现了对旱稻遗传转化的有效控制,为理解旱稻遗传特性和提高旱稻的生长发育水平提供了帮助。