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体外诱导人肾间质成纤维细胞成骨分化的实验研究的中期报告 该实验旨在研究体外诱导人肾间质成纤维细胞(humanrenalinterstitialfibroblasts,HRIFs)成骨分化的可行性及其机制。以下是该实验的中期报告: 实验设计: 1.收集人肾间质组织,从中分离出HRIFs,并用酚红染色鉴定其纯度; 2.将HRIFs分为3组,分别进行以下处理: -对照组:培养基中添加10%FBS; -BMP-2组:培养基中添加10%FBS及50ng/mLBMP-2; -BMP-2+LDN-193189组:培养基中添加10%FBS、50ng/mLBMP-2及2μmol/LLDN-193189。 3.分别培养以上3组细胞,并分别记录其形态学变化、ALP(碱性磷酸酶)活性和细胞迁移率。 中期结果: 1.HRIFs分离成功,并良好生长在培养皿中,纯度较高; 2.对照组细胞形态规整,呈标志性的纤维母细胞样形态;BMP-2组细胞出现典型的成骨细胞样形态,细胞体积增大、胞质碱性磷酸酶染色阳性;BMP-2+LDN-193189组相比BMP-2组细胞体积稍小,并且胞质的ALP染色较弱; 3.ALP活性结果:对照组细胞ALP活性较低,BMP-2组及BMP-2+LDN-193189组的ALP活性显著高于对照组,但BMP-2+LDN-193189组的ALP活性略低于BMP-2组; 4.细胞迁移率结果:BMP-2组细胞迁移率显著高于对照组,而BMP-2+LDN-193189组的细胞迁移率与对照组相近。 结论: 1.HRIFs可以在体外诱导成骨分化,BMP-2是诱导其成骨分化的有效因子; 2.LDN-193189对BMP-2诱导的HRIFs成骨分化有一定的抑制作用; 3.BMP-2不仅可以促进HRIFs的成骨分化还可以增加其细胞迁移率。