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miR-26b靶向Smad4调控猪卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制的中期报告
背景：
在哺乳动物体内，卵巢的主要功能是维持和释放卵子，在此过程中，卵子的发育需要得到卵泡颗粒细胞的支持和协同，而卵泡颗粒细胞的生死和生长发育是维持正常的生殖功能的关键因素。近年来，研究发现，miRNA具有广泛的生物学功能，其中一些miRNA已被证明参与调控卵巢发育和生殖健康。miR-26b是一个高度保守的miRNA，在许多哺乳动物中都存在。miR-26b通过靶向多个基因参与调控肿瘤细胞生长、分化、凋亡和转移等生物过程，但其在卵泡颗粒细胞中的功能目前还不清楚。
研究目的：
本研究旨在探究miR-26b在猪卵泡颗粒细胞中的表达模式及其对Smad4的调控作用，以期为深入研究miR-26b在卵巢生殖发育中的生物功能提供理论依据。
方法：
（1）分离和筛选活体猪卵巢组织的卵泡颗粒细胞；
（2）采用qRT-PCR获得miR-26b的表达水平和Smad4mRNA的表达水平；
（3）克隆和转染miR-26bmimics和inhibitor分别增强和抑制miR-26b的表达水平，利用Westernblot检测Smad4蛋白表达水平；
（4）采用TUNEL和流式细胞术检测卵泡颗粒细胞的凋亡情况。
预期结果：
我们预计miR-26b在卵泡颗粒细胞中的表达水平会比较低。过表达miR-26b可能会降低Smad4mRNA和蛋白的表达量，从而抑制卵泡颗粒细胞的生长和增殖。另外，我们也预计miR-26b抑制剂可能会促进Smad4mRNA和蛋白的表达量，从而促进卵泡颗粒细胞的增殖和生长。对比各组卵泡颗粒细胞的凋亡情况，我们也可以初步探讨miR-26b在猪卵泡颗粒细胞中对凋亡调控的潜在机制。
结论：
本研究将有助于深入探究miR-26b在卵泡颗粒细胞中的作用机制，有望为研究miRNA在卵巢发育和生殖健康中的生物学功能提供新思路和理论支持。