高中生物人教版选修3基因工程的基本操作程序3.doc

基因工程的基本操作程序
课标要求
简述基因工程的原理和技术
能力要求
（1）通过对书中插图、照片等的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力。
（2）通过对基因工程的基本操作程序的学习，使学生在理解步骤的同时，举一反三，对于其他基因工程操作实例做到能理解、能介绍，从而培养学生对相关知识的理解能力及良好的语言表达能力。
（3）通过引导学生在网上的探究活动，引导学生主动参与，乐于探究，培养学生收集和处理科学信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力。
知识网络体系
目的基因：指编码蛋白质结构基因
基因文库
从基因文库中获取基因组文库
目的基因的获取方法部分基因文库
人工合成
PCR：是一项在生物体外复制特定
DNA片段的核酸合成技术。
利用PCR技术扩增目的基因目的：获取大量的目的基因
原理：DNA复制
过程

目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，
基因表达载体的构建并使目的基因能够表达和发挥作用。
（基因工程的核心）目的基因：
基因表达载体的组成：启动子：
终止子：
标记基因：

转化：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定
和表达的过程
农杆菌转化法
导入植物细胞的方法：基因枪法
将目的基因导入受体细胞方法：花粉通道法
导入动物细胞的方法：显微注射技术
导入微生物的方法：
检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因
检测：方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物DNA）
目的基因的检测和鉴定检测目的基因是否转录
方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物mRNA）
检测目的基因是否翻译成蛋白质
抗原—抗体杂交
鉴定：对生物进行个体水平的鉴定
重难热点归纳
提取目的基因的方法
目的基因导入受体细胞的途径。
知识拓展

1．外显子与内含子
一般来说，结构基因都是由外显子和内含子组成，但是，外显子和内含子的关系不是完全固定不变的。有时同一条DNA链上的某一段DNA序列，当它作为编码某多肽链的基因时是外显子，而作为编码另一多肽链的基因时，则是内含子，结果是同一基因可以同时转录为两种或两种以上的mRNA。
2．原核细胞的基因结构与真核细胞的基因结构的异同点
原核细胞的基因真核细胞的基因不同点编码区连续；结构简单编码区有间隔，不连续；结构复杂相同点都有编码区和非编码区；编码区都有调控遗传信息表达的核苷酸序列；编码区上游都有与RNA聚合酶结合的位点
3．获取目的基因的方法
从基因文库中获取
鸟枪法
人工合成

3．目的基因与运载体结合（以质粒为运载体）

4．将目的基因导入受体细胞
受体细胞：细菌
↓氯化钙
细胞壁的通透性增大
↓
重组质粒进入受体细胞
↓
目的基因随受体细胞的繁殖而复制
经典例题剖析
［例1］下列有关基因工程技术的正确叙述是
A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
【解析】基因操作的工具有限制酶、连接酶，一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列。运载体是基因的运输工具，目的基因进入受体细胞后，受体细胞表现出特定的性状，才说明目的基因完成了表达，基因工程的结果是让目的基因完成表达，生产出目的基因的产物，选择受体细胞的重要条件就是能够快速繁殖。
【答案】C
［例2］应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探测疾病的目的。基因探针是指
A．用于检测疾病的医疗器械
B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C．合成β—球蛋白的DNA
D．合成苯丙羟化酶DNA片段
【解析】基因诊断是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA作探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。