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中国猴源环孢子虫的发现及巢式PCR检测方法的建立的综述报告
近年来，随着我国猴群栖息地面积的减少，中国猴病害发病率也日益增加。其中，环孢子虫是导致中国猴群体免疫力下降的主要因素之一。因此，及早发现和治疗环孢子虫感染对于维护中国猴的健康至关重要。本文主要综述了中国猴源环孢子虫的发现以及巢式PCR检测方法的建立。
一、中国猴源环孢子虫的发现
环孢子虫是一种常见的寄生虫，能够感染多种哺乳动物和鸟类。早在1984年，国内学者就曾在中国猴体内发现了一种环孢子虫。随着近年来猴源疾病的增多，我国多地的研究者对中国猴种群进行了环孢子虫的研究，并陆续报道了环孢子虫的存在。如：江西省赣州市的一项研究发现，该地区地域广泛、数量众多的华南猕猴中有71.1%的个体体内存在着环孢子虫寄生；福建省南靖县地区的研究也表明，当地繁殖自然的淮江猕猴中约有78.9%的个体感染了环孢子虫；云南省西双版纳的一项研究显示，西双版纳地区恒河猴中98%的样本都检测到了环孢子虫。
二、巢式PCR检测方法的建立
巢式PCR是一种高效率、高敏感性的分子生物学方法，能够在短时间内检测出样本中微量的目标DNA。针对中国猴感染环孢子虫的情况，目前已经建立了一种基于巢式PCR的检测方法。
该检测方法的关键是设计3对特异性引物，可以放大环孢子虫的18SrRNA基因序列段。其中，第一对引物用于建立一条内参基因，以用于样本的质量控制。第二对引物可以扩增长约400bp的DNA片段，用于检测样本中是否有环孢子虫存在。而第三对引物可以补充检测，其能够扩增另一段长度大约为200bp的DNA片段，用于确定造成检测结果的是环孢子虫而非其他基因。
整个检测过程分为三个步骤：1.样本预处理：严格落实样本保存、处理、消毒、防污染等要求；2.巢式PCR试验过程：分别放置三套PCR模板，反复进行扩增；3.检测结果分析：通过不同PCR产品的出现，确定是否存在环孢子虫的感染。
目前，这种基于巢式PCR的检测方法已经被证明具有高度的特异性和灵敏度，可以在同一样本中检测到不同的环孢子虫亚型，为中国猴的病害防控提供了有力支持。
三、总结
环孢子虫感染是影响中国猴健康的重要因素之一。通过对中国猴感染环孢子虫的分布情况和传染途径的研究，并建立一种高效率的巢式PCR检测方法，不仅可以对中国猴种群的健康状况进行评估，更可以为猴源疾病的预防和治疗提供科学依据。诸多学者的不懈努力也为我们深入认识动物疾病的发生机理和规律，进一步加强对猴源疾病的防控提供了重要参考。