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—602—江苏农业科学2015年第43卷第3期 杭小英,周冬仁,罗毅志,等.地衣芽孢杆菌的生长及对养殖水体中残饵的降解特性[J].江苏农业科学,2015,43(3):206-208. doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2015.03.067 地衣芽孢杆菌的生长及对养殖水体中残饵的降解特性 杭小英1,2,3,周冬仁1,2,3,罗毅志1,2,3,施伟达1,2,3,叶雪平1,2,3,汤美锋1 (1.浙江省淡水水产研究所,浙江湖州313000;2.农业部淡水渔业健康养殖重点实验室,浙江湖州313000; 3.浙江省鱼类健康与营养重点实验室,浙江湖州313000) 摘要:从自然养殖池塘中筛选获得了1株能有效抑制水产养殖常见致病菌的功能菌株DSY002-2011,经鉴定为 地衣芽孢杆菌。通过人工模拟养殖水体中残饵浓度,研究地衣芽孢杆菌对饲料中蛋白质、淀粉的降解特性。结果表 明,分离株DSY002-2011在水温28℃、pH值7的1%饲料培养液中培养24h后,对饲料蛋白质、淀粉的降解率分别 达到58.8%、62.9%,说明在养殖水体中添加地衣芽孢杆菌对水体残余饵料的降解是非常有效的。地衣芽孢杆菌降 解蛋白质、淀粉的合适条件为pH值6~7、盐度0~1.0%。 关键词:地衣芽孢杆菌;降解;盐度;pH值 中图分类号:X714文献标志码:A文章编号:1002-1302(2015)03-0206-02 在高密度、集约化的水产养殖过程中,由于缺乏科学规范硫酸钾、硫酸、20g/L硼酸溶液、混合指示液(1份1g/L甲基 的养殖管理,养殖户一味追求高产量往往会过度投饵,导致养红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合)、 殖水体中积存了大量残余饵料,加上养殖动物的排泄物,使得400g/L氢氧化钠溶液、0.0500moL/L硫酸标准溶液。所有 养殖水体中的有机物浓度增加,水质环境恶化,从而诱发各类试剂均用不含氨的蒸馏水配制。 水产疾病。微生态制剂的调控技术已成为解决养殖水体污染1.1.4仪器生化培养箱、振荡培养箱、离心机、分光光度计、 病害问题的有效手段之一[1-2]。以往研究表明,硝化细菌[3]、凯氏定氮仪、高压灭菌锅、超净工作台、取样器、试管、培养皿等。 光合细菌[4]、芽孢杆菌[5-6]等有益菌在减少病害、净化水质和1.2方法 促进动物生长等方面均有显著效果,但对降解水体残余饵料1.2.11%饲料培养基鳖饲料1.0g,纯净水100mL,混合 蛋白质、淀粉的功能研究报道较少。本试验用从自然养殖池后溶解均匀。 塘筛选到的1株地衣芽孢杆菌DSY002-2011,对其饵料蛋白1.2.2菌株生长与养殖水体中饲料残饵降解的关系将保 质、淀粉的降解特性进行研究,获得其降解规律,为养殖水体存的地衣芽孢杆菌DSY002-2011在普通营养肉汤培养基上 的饲料残饵去除探求一种更为有效的办法,也为今后在水产培养24h,接种于pH值为7、灭菌后的1%鳖饲料培养基, 养殖中科学使用地衣芽孢杆菌制剂提供理论依据。28℃振荡培养。接种后在0、24、48、72、96、120h时取样测 定(从24h时开始测定)、蛋白质含量、淀粉含量。 1材料与方法 1.2.3初始pH值对地衣芽孢杆菌降解饲料残饵能力的影 1.1材料响配制1%鳖饲料培养基5份,pH值分别调为5、6、7、8、9, 1.1.1菌株来源地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformi)灭菌后接种地衣芽孢杆菌,28℃振荡培养,培养至72h时取 DSY002-2011由笔者所在实验室分离、鉴定并保存。样测定蛋白质、淀粉含量。 1.1.2饲料市售鳖配合饲料,由优质白鱼粉、淀粉、酵母1.2.4盐度对地衣芽孢杆菌降解饲料残饵能力的影响配 粉、维生素、矿物质等组成。制pH值为7的1%鳖饲料培养基6份,盐度分别为0、0.5%、 1.1.3药品与试剂菌株生长及试验所需药品与试剂:营养1.0%、1.5%、2.0%,灭菌后接种地衣芽孢杆菌,28℃振荡培 肉汤培养基、0.85%无菌生理盐水、氯化钠、蒸馏水、氢氧化钠养,培养至72h时取样测定蛋白质、淀粉含量。 溶液、稀盐酸等。1.2.5细菌计数及细菌蛋白氮测定地衣芽孢杆菌DSY002- 淀粉测定所需药品与试剂:碘、碘化钾、硝酸钙2011接种于普通营养肉汤中,28℃摇床培养24h。将细菌培 [()]可溶性淀粉养液于离心,弃上清液,用生理盐水 CaNO32·H2O、。4℃、3000r/min10min 蛋白质测定所需药品与试剂:硫酸铜()反复吹打,重复以上步骤次将细菌悬液进行适当稀释,分 CuSO4·5H2O、3。 别用血球计数板法(此方法可测得活菌和死菌的总量)和平 收稿日期:2014-05-06板菌落计数法(此方法测得活菌数量即细菌生长量)进行计 基金