超声辅助提取螺旋藻多糖的实验研究.pdf

2011年6月中成药June2011
第33卷第6期ChineseTraditionalPatentMedicineVol．33No．6

超声辅助提取螺旋藻多糖的实验研究

贲永光1，钟红茂2，李康1，孔繁晟1，李文燕1，杨鼎隆1
(1．广东药学院药科学院，广东广州510006;2．中国科学院南海海洋研究所，广东广州510301)

摘要:目的研究找出超声提取螺旋藻多糖的最佳工艺条件。方法通过对超声功率、提取温度、固液比、超声提取时间
4因素进行研究，并以提取的多糖量为考核指标，采用正交试验法进行考察，确定其最佳工艺条件，并与传统提取法进行
比较。结果温度的适当升高、溶剂量的增大、提取时间的延长、适当增大提取功率有利于提高有效成分的提取率，各因
素的影响大小次序先后为温度＞提取固液比＞提取时间＞超声功率。最佳工艺条件为:提取温度为50℃，提取功率320
W，提取固液比1∶25，提取时间50min，在优化条件下，螺旋藻多糖的提取率是3．2953%，传统回流提取法螺旋藻多糖
提取率为2．2572%。结论相对传统提取方法而言，超声提取具有迅速、节能、操作简便、提取率高等优点，是一种较好
的螺旋藻多糖提取的新工艺。
关键词:超声;螺旋藻;多糖;提取;正交实验
中图分类号:R284．2文献标志码:B文章编号:1001-1528(2011)06-1078-03

螺旋藻多糖是从螺旋藻藻体、螺旋藻培养液中提取分离2．1葡萄糖对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒
出来的一类具有促进细胞生长、提高免疫力作用、抗肿瘤、抗重的葡萄糖50．0mg，置100mL量瓶中，加蒸馏水溶解，稀释
辐射、抗衰老、对核酸内切酶活性和DNA修复合成有增强作至刻度，摇匀。制成标准溶液(0．5mg/mL)。
用等功能的重要天然生物活性物质，是国内外海洋药物研究2．2标准曲线制备精密吸取葡萄糖对照品溶液1．0、
开发的热点。螺旋藻多糖的主要成分有鼠李糖、甘露糖、葡2．0、4．0、6．0、8．0、10．0mL置50mL量瓶中，加水至刻度，摇
萄糖及半乳糖等，它们仅占细胞成分的2%～3%，但却有着匀。精密吸取上述各种质量浓度溶液2．0mL，另精密吸取蒸
独特的生理功能和药用价值。螺旋藻多糖是由O-鼠李糖-甲馏水2．0mL作空白对照，置具塞试管中，加5%苯酚溶液
基鼠李糖和O-己糖醛酸2种双糖重复组成，这种从螺旋藻1．0mL，浓硫酸5．0mL摇匀，于沸水浴中加热15min，冷却，
中分离、纯化的水溶性多糖，可调节人体生理功能，促进细胞于490nm波长测定吸收度值。结果见图。以吸收值A为纵
新陈代谢，增强机体免疫力。将在预防医学、临床医学、保健坐标，质量浓度C为横坐标绘制标准曲线，得回归方程A=
［］
食品等方面发挥重大作用1-5。26541C+0．0113，r=0．9977(n=6)。结果表明葡萄糖质
本研究探讨利用超声提取技术手段对螺旋藻多糖进行量浓度在0．0000025～0．000025g/mL范围内与吸收值线
提取研究，并与常规提取法进行比较。性关系良好。
1材料2．3螺旋藻多糖的制备及定量测定准确称取螺旋藻干粉
1．1材料螺旋藻购自市场(经中国科学院南海海洋研究5．00g→放入圆底烧瓶，加入适量蒸馏水并混匀→按各种设
所鉴定)，经晒干后进行粉碎至40目备用。葡萄糖对照品定条件(时间、功率、固液比、温度)在超声波仪器内进行提
(分析纯，纯度≥99%，广州汕头市西陇化工厂)。取→离心、沉淀(3000r/min，10min)→提取清液→浓缩至
1．2试剂无水乙醇、95%乙醇、丙酮、苯酚、浓硫酸，以上1/5→5倍95%乙醇沉淀→丙酮洗涤，加适量蒸馏水溶解，置
试剂均为分析纯。100mL量瓶中，稀释至刻度，精密吸取2mL置50mL量瓶
1．3主要仪器与设备HH-6恒温水浴锅(江苏金坛市宏华中，加水至刻度，摇匀。精密吸取溶液2．0mL，另精密吸取
仪器厂);RE-52CS旋转蒸发器(巩义市英峪予华仪器厂);蒸馏水2．0mL作空白对照，置具塞试管中，加5%苯酚溶液
予华牌循环水真空泵(河南省巩义市英峪予华仪器厂);1．0mL，浓硫酸5．0mL摇匀，于沸水浴中加热15min，冷却，
UV1101紫外/可见分光光度仪(上海天美科学仪器有限公于490nm波长测定吸收度值，测得多糖得率及质量。
司);AY120电子分析天平(日本岛津公司);KH-400KDB型2．4螺旋藻多糖提取率EY的计算
高功率数控超声清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司);摇()
xtmg
EY=()×100%
摆式高速中药粉碎机(大德中药机械有限公司)。x0g
式中，提取前螺旋藻的质量，提取多糖的质量
2试验方法x0－xt－

收稿日期:2010-07-30
基金项目:中科院海洋生物资源可持续利用重点实验室、广东省