岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册.doc

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪
的图文操作手册
贮液瓶
DGU-20A3
真空脱气机
LC-20AT溶液传输单元
CBM-20A
系统控制器
SPD-M20A二极管阵列检测器
SIL-20A
自动进样器
RF-10AXL荧光检测器
CTO-20A柱温箱
手动
进样器
Varian380-LC
蒸发光检测器
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪：

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪
功能和用途：
功能：本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整溶剂浓度比例，实现高效率、高精度混合；即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器，全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度；也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器；还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样；二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测产生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
操作步骤：
色谱柱的安装
本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
开机
首先打开UPS（不间断电源，蓄电池），然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）
将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。

双击Lcsolution图标。输入用户名Admin，点击OK。单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需将自动进样器去掉。单击仪器（通讯设置），选择正确的仪器类型，然后单击自动获取IP地址。
单击系统控制器，出现系统控制器的对话框，继电器的四个选项需要设置为start。

单击仪器开关按钮，将软件与仪器连接

仪器参数视图里面，简单设置里面，模式选择二元高压梯度，设置总流速，泵B浓度，时间，柱温箱温度，时间程序。然后选择下载，跑基线。单击绘图，可以看查看基线。

方法编辑
a、下图中看到仪器参数视图，选择高级，然后依次改变其中的参数。如果仪器为PDA检测器时，则按以下进行设置。
数据采集：LC停止时间为0.01。采集时间打勾，结束时间为分析样品的时间。
LC时间程序：如果等度洗脱，则设置如图中0.01controllerstop。进行梯度洗脱时需要如图所示进行设置。单击绘制曲线，可查看梯度曲线。
二元有两个泵，高压混合，对气泡不敏感
四元只一个泵，低压混合，对气泡较敏感，须配在线脱气机
二元高压混合和四元低压混合的一个重大区别就是前者进入输液泵后立即进行混合而后者是进泵以后慢慢混合，有的还要过一混合器，混合不但置后，而且效果明显不如前者。
高压梯度现在很多都可以用一个泵来控制另一个泵，而低压梯度往往需要一个梯度控制系统。
几元泵,分为高压混合和低压混合,高压混合又叫泵后混合,hplc几元泵就是几个泵;低压混合又叫泵前混合,其实就是一个泵,几元就是安装几路电磁阀
泵，可组装成为二元高压梯度与四元低压梯度两种系统，两者区别如下：
二元高压梯度：
配置：双泵+在线混合器
工作方式：双泵并联，可同时有两个流动相，按照预先设定的配比进入，再高压下进行混合，混合配比更准确，不易产生气泡，不用为了转换流动相而反复清洗，提高了工作效率。同时可以做梯度洗脱，当待测样品成分复杂，用一个固定的流动相配比无法将样品中成分完全分开时，就需要用到梯度洗脱，在同一个分析过程中由仪器自动改变流动相配比，将样品中前次无法分离的物质进行洗脱，在同一谱图中得到分开的峰的效果。有助于提高分析准确性，避免遗漏重要物质的检测。
hplc四元低压梯度：
配置：单泵+低压梯度阀+在线脱气机+混合器
工作方式：最多可同时有四个流动相进入流路，按照预先设定的配比进行混合，由于在常压下混合所以较易产生气泡，因此必须配备在线脱气机，可消除气泡影响。可以做梯度洗脱，在仪器上进行设定之后，在同一样品分析工程中，相隔一段时间后，按照用