对单增李斯特菌有抑制作用的乳酸菌的筛选鉴定及其细菌素的研究.pdf

现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2014,Vol.30,No.5

对单增李斯特菌有抑制作用的乳酸菌的筛选鉴定及

其细菌素的研究

朱传胜，高玉荣，徐国栋
（黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆163319）
摘要：本文采用双层平板法从中国东北地区发酵酸黄瓜中进行产抑单核增生李斯特氏菌细菌素的乳酸菌的筛选和鉴定，对其产
生的细菌素进行了分离纯化、分子量测定及稳定性研究。在排除有机酸和过氧化氢的影响后，从东北发酵酸黄瓜中筛选到一株对单核
增生李斯特氏菌仍有抑制作用的乳酸菌ZLG85，酶解实验发现该抑菌物质可完全被胃蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶降解，确定该
抑菌物质为细菌素。经形态和生理生化实验初步鉴定该菌株为明串株菌属；16SrDNA序列同源性分析将乳酸菌ZLG85鉴定为肠膜
明串珠菌肠膜亚种。理化分析表明该细菌素的热稳定性很强，121℃处理30min后相对抗菌活性仍为93.77%，pH值在2.0~10.0范围
内处理4h后相对抗菌活性在80%以上。N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定肠膜明串珠菌素ZLG85的分子质量约为2.5kDa。
因此，肠膜明串珠菌素ZLG85是一种稳定性强的新型抗李斯特氏菌的乳酸菌细菌素。
关键词：肠膜明串珠菌素；菌种鉴定；生物稳定性；分子量
文章篇号：1673-9078(2014)5-87-91
ScreeningofLacticacidbacteriaforProductionofAnti-listeriaBacteriocin
ZHUChuan-sheng,GAOYu-rong,XUGuo-dong
(CollegeofFoodScience,HeilongjiangBayiAgriculturalUniversity,Daqing163319,China)
Abstract:Bydoubleagardiffusionmethods,thestrainproducingbacteriocinwithinhibitoryactivityagainstListeriamonocytogeneswas
screenedandidentifiedfromChinesenortheastfermentedcucumber.Andthebacteriocinwasseparatedandpurifiedanditsmolecularmassand
stabilitywereresearched.Aftereliminatingtheeffectsoforganicacidsandhydrogenperoxide,thestrainofLactobacillusspp.ZLG85which
stillhadactivityagainstListeriamonocytogeneswasscreened.Theinhibitoryactivitywasdegradedsharplybypepsin,trypsinandneutral
proteaseinenzymatichydrolysis,whichwasconfirmedthatZLG85canproducebacteriocin.Byappearancedetection,physiologicaland
biochemicalcharacteristicsanalysisand16SrDNAgenesequencehomologyanalysis,ZLG85wasidentifiedasLeuconstocmesenteroides
subsp.mesenteroides.PhysicalandchemicalanalysisshowedthatthemesentericinZLG85washeat-stable.Itsrelativeinhibitoryactivitywas
93.77%afterincubationat121℃for30min,andabove80%afterincubation4hwithinawidepHrangefrom2.0to10.0.Themolecular
weightofmesentericinZLG85was2.5kDaconformedbytricine-SDS-PAGEelectrophoresis.MesentericinZLG85isanewkindofbacteriocin
withstrongstabilityagainstListeriamonocytogenes.
Keywords:mesentericin;identification;biologicalstability;molecularweight

乳酸菌细菌素（Bacteriocins