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蠕形螨cDNA文库的构建及初步分析的中期报告
一、研究背景和目的：
蠕形螨（Acarussiro）是一种常见的室内螨类，通常存在于家居物品、家具、地毯等处，严重的会引起过敏症状，如哮喘、过敏性皮炎等。为了深入了解蠕形螨的生物学特性和分子机制，我们选择构建蠕形螨cDNA文库，并对其进行初步分析。
二、实验方法：
1.蠕形螨cDNA文库构建：
采用SMART技术，从成年蠕形螨中提取总RNA，利用PolyA+RNA提取酶和Oligo（dT）20寡核苷酸为基础，制备正反链cDNA，并以pGEM-TEasyVector为载体进行克隆。随后，将克隆的cDNA插入质粒并进行转化，最后得到蠕形螨cDNA文库。
2.初步分析：
采用BLASTx软件对得到的cDNA序列进行比对分析，利用ClustalX软件对同源序列进行多序列比对、系统进化树构建等分析。
三、实验结果：
1.蠕形螨cDNA文库构建：
使用SMART技术制备了蠕形螨cDNA文库，文库容量为约2×106个菌落，并通过PCR检测和重筛选，筛选到了高质量的cDNA克隆。
2.初步分析：
比对分析表明，蠕形螨cDNA序列与已知的多个物种的基因序列存在高度同源性。多序列比对和系统进化树分析表明蠕形螨与某些螨类物种较为接近。
四、结论：
成功构建了蠕形螨cDNA文库，并对其进行了初步分析，为深入研究蠕形螨的生物学特性和分子机制奠定了基础。