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红曲米粉中桔青霉素的测定—HPLC法解决方案

参考标准《QB/T2847-2007功能性红曲米(粉)》

红曲米粉是指以大米为原料，用红曲菌属(Monascusspp)红曲霉发酵培养
制得，具有红色的颗粒或用其制成的粉末。目前红曲可分为色曲、酒曲和功能性
红曲。在红曲霉的发酵过程中，同时与红曲色素相伴产生一种有害的次级代谢产

物--桔青霉素。研究表明桔青霉素具有肾毒性，可致畸、致癌和诱发基因突变。
桔青霉素的存在，制约了红曲在食品及药品方面的广泛应用，在一定程度上阻碍

了红曲产业的发展。

目前红曲米粉中桔青霉素检测难点是净化效果差，影响目标物的定性与定

量。

方法优势：

迪马科技依照国标《QB/T2847-2007功能性红曲米(粉)》中样品预处理方
法及HPLC条件，配合使用固相萃取柱进行净化，建立了红曲米粉中桔青霉素
的测定方法，该方法：

1.采用95%甲醇水超声提取，浓缩经混合型强阴离子交换柱净化，运用
HPLC-FLD测定；

2.本方法定量限是10μg/kg，回收率达90%以上，保证实验结果的准确性、重
现性；

3.本方案具有前处理简单，回收率高，除杂效果明显、方法重现性好等优点；

4.适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食
品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。

以下为详细解决方案，敬请参考！

红曲米粉中桔青霉素的测定—HPLC法

1、适用范围

本方案适用于红曲米粉中桔青霉素的检测，方法定量限是10μg/kg。

北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520
成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230
济南：0531-83681355重庆：023-62568657

2、提取

(1)1.0g样品，加入10mL95%甲醇水溶液，混匀，超声10min，间隔振荡，
6000rpm离心2min，取上清液；
(2)向下层残渣中加入8mL95%甲醇水溶液，混匀，超声10min，间隔振荡，
6000rpm离心2min，合并上清液；
(3)将上清液在35℃水浴下减压蒸馏至剩水，加入2mL甲醇，超声溶解，6000
rpm离心1min，取上清液，待净化。

3、净化——ProElutPXA60mg/3mL（Cat#：68303）

a活化：加入3mL甲醇活化；
b上样：加入待净化液，弃去流出液；
c淋洗：加入3mL5%甲酸甲醇溶液，弃去流出液；
d洗脱：加入2mL0.2M盐酸甲醇溶液，收集流出液，供HPLC分析。

4、色谱条件

色谱柱：PlatisilODS，150x4.6mm，5μm（Cat#：99501）
流速：1.0mL/min进样量：20μL柱温：28℃
检测器：FLD，Ex：331nm；Em：500nm
流动相：A：1%磷酸水溶液B：乙腈A：B=57：43

5、添加回收结果

红曲米粉中桔青霉素的HPLC检测添加回收结果
样品添加水平(mg/kg)回收率（%）
0.0597.53
红曲米粉
0.2097.23

1桔青霉素
Volts
1
0.000.02
01020
Time(min)
桔青霉素标准品(0.025mg/L)液相色谱图

北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520
成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230
济南：0531-83681355重庆：023-62568657

1
1桔青霉素
Volts
0.000.02
01020
Time(min)
桔青霉素标准品(0.1mg/L)液相色谱图

1桔青霉素
Volts
1
0.000.02
01020
Time(min)
添加水平为0.05mg/kg红曲米粉中桔青霉素检测液相色谱图

1
1桔青霉素
Volts
0.000.02
01020
Time(min)
添加水平为0.20mg/kg红曲米粉中桔青霉素检测液相色谱图

北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520
成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230
济南：0531-83681355重庆：023-62568657

Volts
0.000.02
01020
Time(min)
红曲米粉中桔青霉素检测(空白样品)的液相色谱图