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菌物学报 jwxt@im.ac.cn15March2014,33(2):375‐384 Http://journals.im.ac.cnMycosystemaISSN1672‐6472CN11‐5180/Q©2014IMCAS,allrightsreserved. 研究论文ResearchpaperDOI:10.13346/j.mycosystema.130036 金针菇子实体多糖分离纯化及结构和免疫活性研究 许晓燕1余梦瑶1魏巍1江南1伍明2郑林用3罗霞1* 1四川省中医药科学院四川成都610041 2四川大学生命科学学院四川成都610041 3四川省农业科学院四川成都610066 摘要:从金针菇子实体中分离纯化多糖,并对多糖结构和体外免疫活性进行研究。采用水提醇沉法从金针菇子 实体中提取粗多糖,利用DEAE‐Cellulose‐52及SephacrylS‐300HR柱层析纯化得到FVPⅠ‐a,再利用HPLC‐ELSD技术、 红外及核磁共振对FVPⅠ‐a进行结构解析。在体外以促RAW264.7巨噬细胞产NO、分泌细胞因子,促进小鼠淋巴 细胞增殖实验,考察FVPⅠ‐a增强免疫的能力。从金针菇子实体中分离纯化得到FVPⅠ‐a,其为分子量81.4kDa, 由葡萄糖、果糖和鼠李糖组成的β构型的吡喃型杂多糖。体外免疫实验表明,FVPⅠ‐a能够促进RAW264.7巨噬细 胞产生NO及分泌细胞因子(IL‐1β,IL‐6,TNF‐α),能单独的促进小鼠淋巴细胞增殖(P<0.05),并能协同增强ConA 和LPS对小鼠淋巴细胞的促增殖作用(P<0.01,P<0.05)。首次从金针菇子实体中获得FVPⅠ‐a杂多糖,其在体外 具有增强非特异性免疫反应及增强特异性免疫反应的能力。 关键词:金针菇,杂多糖,结构,一氧化氮,细胞因子,免疫 Extraction,structurecharacteristicsandimmuneactivitiesof polysaccharidesfromthefruitingbodyofFlammulinavelutipes XUXiao‐Yan1YUMeng‐Yao1WEIWei1JIANGNan1WUMing2ZHENGLin‐Yong3LUOXia1* 1SichuanAcademyofTraditionalChineseMedicine,Chengdu,Sichuan610041,China 2CollegeofLifeSciences,SichuanUniversity,Chengdu,Sichuan610041,China 3SichuanAcademyofAgriculturalSciences,Chengdu,Sichuan610066,China Abstract:ThepolysaccharidesfromthefruitingbodyofFlammulinavelutipeswereextracted,andthe 基金项目:四川省精深加工研究岗位建设项目[川农业(2009)75号];菌类药材研究与开发四川省青年科技创新 团队(No.2011JTD0021);四川省重大科技计划项目食药用菌现代产业链关键技术研究集成与产业化示范;农业微 生物平台项目;四川省十二五育种攻关项目菌类药材优质种质资源的收集及新材料的选育(No.2011NZ0098‐12‐08) *Correspondingauthor.E‐mail:lx1443_cn@sina.com 收稿日期:2013‐01‐29,接受日期:2013‐10‐28 376ISSN1672‐6472CN11‐5180/QMycosystemaMarch15,2014Vol.33No.2 immunity‐enhancingactivitiesofthepolysaccharidesinvitrowereevaluated.Bywaterextractionandalcohol precipitation,crudepolysaccharideswereobtained.ThroughpurificationbyDEAE‐Cellulose52ionexchange chromatographyandSephacrylS‐300HRgelfiltrationchromatography,apolysaccharidenamedasFVPI‐awasobtained. HPLC‐ELSDtechnology,IRandNMRwereusedtoevaluatethestructureofFVPI‐a.NOproductionofRAW264.7 macrophages,cytokinessecretionan