植物乳杆菌转糖基活性β-半乳糖苷酶合成功能性低聚糖的研究的中期报告.docx

植物乳杆菌转糖基活性β-半乳糖苷酶合成功能性低聚糖的研究的中期报告
这是一篇关于植物乳杆菌转糖基活性β-半乳糖苷酶合成功能性低聚糖的研究的中期报告。
背景：
功能性低聚糖是一类被广泛认可的预生物，已经展现出了多种良好的健康效应，包括增加肠道健康和免疫力等。这些低聚糖有多种来源，包括天然的和人工制备的。其中，分解淀粉和蔗糖等多糖的酶促反应是重要的制备途径之一。在本研究中，我们将重点关注一种具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶，用它来合成功能性低聚糖。
目的：
通过研究β-半乳糖苷酶的转糖基活性，利用其合成功能性低聚糖，以期得到新的功能性低聚糖。
方法：
1.酶基因的克隆和表达
我们利用PCR技术从植物乳杆菌中扩增出了β-半乳糖苷酶基因，并将其克隆到pET21a(+)载体中，在大肠杆菌中进行了表达和纯化。
2.酶的放糖试验
我们使用β-半乳糖苷酶将乳糖水解成半乳糖和葡萄糖，并用HPLC检测放糖的产物。结果表明，β-半乳糖苷酶能够有效水解乳糖。
3.以葡萄糖为供体合成低聚糖
我们通过不同的反应时间和温度组合使用β-半乳糖苷酶和葡萄糖，来合成含有不同程度聚合度的低聚糖。目前，我们成功合成了2~4个葡萄糖残基的低聚糖。
结论：
我们成功地克隆和表达了植物乳杆菌的β-半乳糖苷酶，并证明了它的转糖基活性。此外，我们也成功地使用β-半乳糖苷酶合成了具有一定聚合度的功能性低聚糖。这为我们进一步研究功能性低聚糖的制备提供了基础。