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溶藻弧菌ompW基因的克隆表达及DNA疫苗的研制的综述报告 溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)是一种常见的海洋病原菌,可引起多种动物的感染,如虾和鱼类。在水产业中,溶藻弧菌感染的发生率越来越高,给养殖业带来了极大的经济损失。因此,开发溶藻弧菌的免疫对策成为一个重要的研究方向。 OMPW(OuterMembraneProteinW)是溶藻弧菌的一种外膜蛋白,具有良好的免疫原性和保护性,成为了开发疫苗的一个良好的候选分子。在过去的几年中,已有多个研究组对OMPW基因进行了克隆表达和DNA疫苗的研制。 克隆表达是通过将基因插入到表现载体中,使宿主细胞能够表达目的蛋白。李云发等人采用pET28a载体,利用基因工程技术将OMPW基因表达于大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中。经过纯化和鉴定,得到了高纯度的OMPW蛋白。该研究表明,通过克隆表达的OMPW蛋白能够诱导小鼠生成高水平的抗体,且该抗体能够降低小鼠体内的V.alginolyticus病原体数量,显示出良好的保护作用。 另一种研究方法是DNA疫苗。DNA疫苗是通过将目的基因的DNA序列注入宿主细胞,使宿主细胞自主合成目的蛋白,从而达到免疫效果。孙小华等人通过将OMPW基因插入pGEMEX-1载体中,经过大肠杆菌DH5α紧密嵌合表达蛋白后制备DNA疫苗。实验结果表明,接种该DNA疫苗的小鼠能够产生高水平的特异性抗体,且能够降低小鼠体内的V.alginolyticus群体数量。 除了上述两种方法之外,还有一些研究将DNA疫苗与蛋白质疫苗进行混合使用,形成复合疫苗。如Bertani等人将OMPW基因插入pET23a载体中表达,并通过纯化得到OMPW蛋白。同时,采用类似方法制备OMPWDNA疫苗。之后,两种疫苗进行混合,接种到小鼠中进行实验。结果表明,复合疫苗接种小鼠后能够有效地诱导产生高水平的特异性抗体,并能够降低小鼠体内的V.alginolyticus数量。 总的来说,OMPW基因表达蛋白和DNA疫苗是目前研究的主要方向。这些研究结果表明,OMPW自身具有优良的免疫特性,能够有效地诱导免疫反应,并且具有保护作用。但是,还需要进一步的研究来验证其在实际生产中的有效性和安全性。