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犬副流感病毒的分离及单克隆抗体的制备的综述报告 犬副流感病毒(CIV)是一种能够感染犬类的病毒,属于正链RNA病毒家族。2015年犬副流感疫情的爆发引起了广泛的关注,并且在全球范围内均有发生。因此,研究CIV的分离和制备相应的单克隆抗体具有重要的意义。 一、CIV的分离 CIV是通过病毒培养分离获得的。首先需要从感染犬的上呼吸道或肺组织中收集病毒,然后使用不同的细胞系进行病毒培养。近年来,犬宫颈癌细胞系(CCL-94)对于CIV的分离具有较高的效率。研究表明,将病毒接种至CCL-94中培养24-48小时,可观察到细胞的明显病变和病毒繁殖。 二、CIV的单克隆抗体制备 CIV的单克隆抗体主要是通过对病毒的感染进行后续细胞培养和纯化获得的。 1.病毒刺激:将病毒接入特定的细胞株,如BALB/c小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0中,可使得B细胞受到激励,并产生抗体。 2.融合:将从病毒接种产生抗体的B细胞与肿瘤细胞融合成为杂交瘤细胞,通常使用聚乙二醇作为融合剂。 3.筛选:将融合细胞分装至96孔板中并使用特定培养基进行培养,筛选出单克隆抗体。此步骤通常通过筛选抗体反应性、亚型、亲和力等参数来完成。 4.纯化:选择抗体反应效果好的单克隆细胞株进行扩增,并使用特定的免疫亲和层析柱纯化出纯度较高的抗体。 三、应用 CIV的单克隆抗体主要用于病原学研究、病毒诊断以及疫苗开发。通过使用单克隆抗体可以准确快速地检测出CIV,同时可以为疫苗开发和临床治疗提供重要的参考。 总之,CIV作为一种新的呼吸道病毒,对于深入了解其病原学特性以及开发相应的疫苗具有重要的意义。通过CIV的分离和单克隆抗体制备可以为其未来的研究提供有力的支持。